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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
55
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人单核细胞 | T25瓶 | LZ-YX9910 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 神经星形胶质细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) |
| b16 小鼠黑色素瘤细胞 | 棕榈酰蛋白硫酯酶1抗体 |
| 人表皮角质细胞-裂解物HEK-a L | RNA结合蛋白9抗体 |
| TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Irx3蛋白抗体 |
| Hep G2细胞,肝癌细胞 人细胞(HPV-18永生化细胞),HeLa229细胞 人脐带间充质干细胞cDNAHUMSC cDNA | 细胞因子诱导凋亡抑制因子1 |
| SW 780(人膀胱移行细胞癌) 5×106cells/瓶×2 5637(人膀胱癌细胞) | 肌球蛋白轻链激酶抗体 |
| NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人细胞裂解液 (阳性对照) | 细胞质连接蛋白1抗体 |
| MCAM Others Human 人 CD146 / MCAM 人细胞裂解液 (阳性对照) | G蛋白偶联受体102抗体 |
| CTSZ Others Mouse 小鼠 CTSX 人细胞裂解液 (阳性对照) | 骨形态发生蛋白8b抗体 |
| MA-891(小鼠癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | 轴突蛋白3抗体 |
| LILRB3 Others Mouse 小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人细胞裂解液 (阳性对照) | 凋亡相关蛋白激酶2抗体 |
| CM-H124人脑微血管内皮细胞完全培养基100mL | 热休克蛋白70家族蛋白6抗体 |
| 人单核细胞IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) | 酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗体 |
| 犬肾细胞;MDCK(NBL-2) | KLF样转录因子8抗体 |
| ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人细胞裂解液 (阳性对照) | CD20抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
白细胞之一,胞体较大,直径约为15-30酶μm,胞质内没有颗粒,它们约占血液中白细胞数的4%-8%。单核细胞来源于骨髓中的造血干细胞,并在骨髓中发育。当它们从骨髓进入血流时仍然是尚未成熟的细胞。与其他血细胞比较,单核细胞内含有更多的非特异性脂酶,并且具有更强的吞噬作用。单核细胞在血液中停留2-3天后迁移到周围组织中,细胞体积继续增大,直径可达50-80μm,细胞内所含的溶酶体颗粒和线粒体的数目也增多,成为成熟的细胞。固定在组织中的单核细胞称为组织巨噬细胞,它们经常大量存在于淋巴结、肺泡
亦称单球、单核白细胞、大淋巴细胞。约占人流动血液白细胞的4— 8%,与淋巴细胞和粒细胞是完全不同的一个独立的白细胞系统。直径为 13— 21微米(平均 16.7微米),在血细胞中最大,核的染色性很弱,也有没有颗粒,但多数在细胞的中心部分含有天青颗粒。氧化酶反应为弱阳性,游走能力虽然较弱,但吞噬作用却非常强。炎症组织内的巨噬细胞主要是这种细胞,单核细胞与以往所认识的不同,现已确定它不能过渡成为嗜中性白细胞。它与移动型大单核细胞合称为单核细胞。关于其起源问题,很早就有过争议,但现在均认为
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