- ￥468 - 3900
- 邦景
- BJ-PJ6587
- 国产
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
6
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
1ml/10ml
| 规格： | 1ml | 产品价格： | ￥468.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 10ml | 产品价格： | ￥3900.0 |
商品属性：
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| 2XRAPA HiFi PCR Mix(with dye) | BJ-PJ6587 | 1ml | 468 |
| 2XRAPA HiFi PCR Mix(with dye) | BJ-PJ6587 | 10ml | 3900 |
产品介绍：
RAPA HiFi DNA 聚合酶，其来源于高保真 DNA 聚合 酶，并加入了增强的延伸结构，使其具有超保真性能（~280 倍 Taq）、长片段扩增能力、高产量。长片段扩增能力，使用 该酶可轻松扩增 8kb 的基因组 DNA、20kb 的λ DNA、8kb 的 cDNA。该酶具有 6kb/min 以上的延伸速度。该 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、强 3’-5’的外切酶活性，产物为平末 端。该制品中已经含有溴酚蓝染料，PCR 扩增完毕后可直接 点样于琼脂糖凝胶，无需再加入 DNA Loading Buffer。
特点和用途
(1) 超保真扩增：~280 倍 Taq 的保真性能，是载体构建、点突变、NGS 模板扩增、基因合成的最佳用酶。
(2) 快速扩增：具有 6kb/min 的扩增能力。
(3) 长片段扩增：质粒、λDNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb，基因组可以有效扩增>8 kb，cDNA 可以有效扩增>8kb。
储存：长期储存置于-20°C 以下，可保存 2 年；短期使用置于 4°C（3 个月）保存。
使用方法
1. 按下表配制反应体系并混合均匀：
2×RAPA HiFi PCR Mix 12.5 μl
上游引物(10 μM) 1 μl
下游引物(10 μM) 1 μl
模板 DNA 1-250 ng
ddH2O up to 25 μl
*模板 DNA 用量参数(25 μl 反应体系)
5-250 ng Genomic DNA
0.1-10 ng Plasmid DNA
1-2 μl cDNA from RT reaction
2. PCR 扩增循环参数
（1）扩增片段<5kb 时采用如下程序
循环数 温度 时间
1st Cycle 95°C 1min
25-35 Cycles
95°C 30s
50~60°C 30s
72°C 6kb/min
Last Cycle 72°C 2min
（2）扩增片段>5kb 时采用如下程序
循环数 温度 时间
1st Cycle 92°C 1min
25-35 Cycles
92°C 30s
50~60°C 30s
72°C 2-3kb/min
Last Cycle 72°C 2min
3. 电泳：1% 琼脂糖凝胶电泳，上样 5 μl，电泳结束在紫外灯下检测条带。
4. 注意事项：（1）当模板 GC 含量>65%时，请添加
5× Q-Solution（Cat. No.: A3002）。（2）当扩增片段<1kb 时，延伸时间可直接使用 15s，当扩增片段>5kb 时，按照2-3kb/min 的延伸时间进行设置，能获得更高的产量。（3）由于不同的 PCR 管其导热性能有所不同，通常 PCR 采用25μl 体系可以获得更高的产量。
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文献和实验Inverse PCR & Cycle Sequencing
sequenced without extensive purifications. Prior to sequencing, simply pass PCR reactions through Qiagen PCR purification columns (P/N 28104) to remove primers and nucleotides and elute in 50-80 ul of 10 mM Tris. This step is essential when dye terminator
实时荧光定量 PCR 技术（Quantitative Real-time PCR，简称 qPCR）是在 PCR 扩增过程中，通过实时监测荧光信号的变化，达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断，动物疾病监测，食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延，qPCR 技术更是因其检测通量高，速度快，操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果，我们需要注意哪些方面呢？其实决定一次实验成功
Taq-polymerase catalyzed cycle sequencing using fluorescent-labeled dye terminator reactions
in the reaction mix. We have recently observed that the nested fragment set distribution for the DNA cycle sequencing reactions using the fluorescent labelled terminators (8) is much less sensitive to DNA concentration than that obtained with the fluorescent
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