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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
34
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)
2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR 产品仅供科研使用
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品(引物、RNA和cDNA)
产品名称:RT-(RT-)抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒
规格:Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae(R-Kp)
编号:BJR2217
分类:探针法荧光定量PCR
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
规格及成分:
成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT(末端转移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
特点优势:
1. 产品仅用于科研特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR反应五要素:
RT-(RT-)抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
异阿魏酸(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid Humancatecholamine,CAELISA试剂盒人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 ,英文名: FFA ELISA Kit
异补骨脂查尔酮;补骨脂乙素质量规格:HPLC≥98%,标准品Isobavachalcone 转基因油菜(canola)HCN92品系试剂盒20 人抗单核细胞抗体(AMA)ELISA检测试剂盒Humanai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 96T/48T
异补骨脂二氢黄酮(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Isobavachin humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人类似RIKENcDNA2610307008基因ELISA试剂盒规格:96T/48T 大鼠白介素1受体样1(IL1RL1)试剂盒 Rat IL-1 Receptor Like 1,IL1RL1 ELISA Kit
异补骨脂素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Angelicin 小鼠八聚体结合转录因子4(OCT4)ELISA试剂盒 ,英文名: OCT4 ELISA Kit CLIAKitfoE(Humaelomerase)ELISAKit人端粒酶规格:48T/96T
MouseAmylinELISA试剂盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 33889-69-9水飞蓟汀厂家 Silicristin
小鼠原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)ELISA试剂盒 ,英文名: Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1 ELISA Kit 29782-68-1水飞蓟宁说明书 Silydianin
小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA检测试剂盒MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T 72581-71-6异水飞蓟宾品牌 Isosilybin
人谷氨酸[NMDA]受体亚基ε-2(-2)抗体试剂盒 Human -2 Aibody ELISA Kit 510-30-5刺囊酸规格 Echinocystic acid
RatGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit大鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒规格:96T/48T 17086-76-9杯苋甾酮厂家 Cyasterone
13476-25-0乌药内酯规格 Linderane 英文名称RatGamma-aminobyricacidELISAKit大鼠γ氨基(GABA)规格:96T/48T
13463-28-0圣草苷厂家 Eriocitrin 英文名称RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD)规格:96T/48T
134418-28-3脱水穿心莲内酯规格 dehydroandrographolide 英文名称RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD)规格:96T/48T
134-01-0氯化芍药素品牌 Peonidin chloride 英文名称Ratf-β-HCGELISAKIT大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-β-HCG)规格:96T/48T
1
RT-(RT-)抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒英文名称HumanPDGFELISAKit人血小板衍化生长因子(PDGF)规格:96T/48T 换规格换规格品牌 换规格
化线粒体DNA/RNA同步萃取试剂盒20 醉鱼草皂苷Ⅳ规格 buddlejasaponin IV
RatInhibin,INH-AELISA试剂盒大鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T 24512-63-8栀子苷厂家 Geniposide
小鼠早期生长应答因子2(EGR2)ELISA试剂盒 ,英文名: EGR2 ELISA Kit 84687-43-4黄芪甲苷说明书 Astragaloside IV
胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒MonkeyCollagenaseIELISAKit 96T/48T 21967-41-9黄芩苷品牌 Baicalin
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果:将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验随机引物 适用于长的或具有发卡结构的 RNA。适用于 rRNA、mRNA、tRNA 等所有 RNA 的反转录反应。主要用于单一模板的 RT-PCR 反应。 Oligo dT 适用于具有 PolyA 尾巴的 RNA。(原核生物的 RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA 和 tRNA 不具PolyA 尾 巴。)由于 Oligo dT 要结合到 PolyA 尾巴上,所以对 RNA 样品的质量要求较高,即使有少量降解也 会使全长 cDNA 合成量大大减少。 基因特异性引物 与模板序列互补
定量RT-PCR (Quantitative RT-PCR)
A = B(1+e) n A=amplified products, B=input templates, n=cycle number, and e=amplification efficiency. Factors affecting amplification efficiency in the RT-PCR process include the efficiency of reverse
性由两个人工合成的引物序列决定。反应分三步: A.变性:通过加热使 DNA 双螺旋的氢键断裂,形成单链 DNA; B.退火:将反应混合液冷却至某一温度,使引物与模板结合。 C.延伸:在 DNA 聚合酶和 dNTPs 及 Mg2+存在下,退火引物沿 5‘ —— 3’ 方向延伸。 以上三步为一个循环,如此反复。 3. 逆转录酶和 RT-PCR 逆转录酶(reverse transcriptase)是存在于 RNA 病毒体内的依赖 RNA 的 DNA 聚合酶,至少具有以下三种活性: (1)依赖 RNA
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