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细胞消化与解离试剂

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  • 211042、211052、211062
  • 江苏无锡
  • 2026年01月20日
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      无锡耐思生命科技股份有限公司

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    在组织细胞的体外培养和原代细胞培养的过程中,需要使用组织细胞消化与解离试剂使组织细胞得以解离和分散,以便进行单个细胞悬液的 制备或贴壁生长传代细胞培养。常用的消化液有胰蛋白酶(Trypsin)-EDTA、胶原酶和分散酶等。NEST®提供多种效能不同的细胞消化液,以满 足您在原代细胞分离和贴壁细胞传代培养中的不同需求。

    胰蛋白酶
    胰蛋白酶(Trypsin)是一种丝氨酸水解酶,它能够把多肽链中赖氨酸和精氨酸 残基中的羟基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或 贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓 度、温度和作用时间有关,在pH8.0和37°C时,胰酶的作用能力最强。因此,在使 用胰酶时,应当把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。一般常 用胰酶的工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度 (0.05%)的胰酶进行细胞消化。 由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+,从而破坏细胞连接促进细胞的解离,因此在胰 酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用,以增强解离效果。对于EDTA可 能会干扰后续的测试分析时,推荐选择不含EDTA的消化液。具体请参考以下表 格选择合适的胰蛋白酶产品。
    产品名称 EDTA 酚红 应用 货号
    0.25%Tryps in-EDTA,无酚红 × 改良型产品消化细胞时间更 短,消化效果媲美进口产品,特 别适用于难以消化的细胞。 211042
    0.25%Trypsin-EDTA,酚红 211052
    0.25%Trypsin-no EDTA,无酚红 × × 211062

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    • 组织解离的常见问题及答案

      取出所需分装管,并在规定时间内使用完毕,避免整管长时间暴露于室温。   4. 机械解离法 vs 酶解法 vs 组合法? 解离方法各有优缺点,根据不同组织类型和需求选择合适的解离方式。 (1)机械解离法:通过剪切、研磨、吹打等物理力破坏细胞间连接,无需酶试剂无需孵育时间成本较低,但是容易造成细胞损伤(如碎片多活率低)和解离不完全(如致密组织),常用于快速解离脾脏等柔软组织。 (2)酶解法:利用蛋白酶(胶原酶、胰酶、木瓜蛋白酶等)降解细胞外基质,温和解离保护细胞膜完整性,但是易破坏表位,且需要挑选合适

    • 组织解离的常用方法以及应用方向全梳理

      -132-997)进行进一步纯化以满足测序要求。   FFPE 样本(福尔马林固定石蜡包埋):甲醛固定导致蛋白质和核酸发生交联和片段化,无法用于制备活细胞。此类样本同样可以使用商业化试剂盒(130-134-089)分离细胞核进行 snRNA-seq 或使用解离试剂盒(130-118-052)解离分选后进行基因组分析。   自动化样本解离制备细胞平台   (1)传统细胞制备方法的局限性 传统的样本制备方法,尤其是对复杂实体组织(如肿瘤、脑组织、纤维化组织)的处理,长期以来严重依赖手动操作。手动解离

    • Annexin V 凋亡试剂盒常见问题

      。 Q:检测凋亡用的细胞能否固定? A:甲醛固定液会造成结果假阳性,因此用于 Annexin V 凋亡检测的细胞不能进行固定。 需要注意的是,Annexin V 检测的样本为外周血时,勿使用含有多聚甲醛等固定液成分的红细胞裂解液来处理细胞。 Q:有没有更好的办法处理贴壁细胞,来做流式凋亡实验? A:检测贴壁细胞时,若消化时间不易控制,建议用 Accutase 细胞消化液,对细胞损伤小且不会改变细胞膜上 PS 的分布。 Q:Annexin V 系列有很多种不同组合试剂盒,该如何选

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