- ￥770 - 1290
- wksubio
- WS7290W
- 国内
- 2025年10月16日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Free Fatty Acid Content (FFA) (Enzyme Method) Kit
- CAS号：
WS7290W
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥770.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥1290.0 |
本试剂盒仅供科研使用
游离脂肪酸(NEFA)(酶法)含量测定试剂盒说明书
（货号：WS7290W 微板法 96 样）
一、产品简介：
游离脂肪酸又称非酯化脂肪酸(Nonestesterified fatty acid NEFA)。其是由油酸，软脂酸，亚油酸
等组成。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。也可反映食物贮藏中
的品质变化。
游离脂肪酸和辅酶A在乙酰辅酶A合成酶（ACS）的作用下反应生成乙酰辅酶A，乙酰辅酶A在
乙酰辅酶A氧化酶的作用下成生H2O2，随后通过Trinder底物在过氧化物酶（POD)的作用下生成
有色产物。通过测定该有色产物在546nm处的值即可得出样本中游离脂肪酸的含量。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
标准管
液体 0.2mL×1 支
4℃保存
浓度为1mmol/L。
三、所需仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、离心机、蒸馏水。
四、游离脂肪酸(NEFA)含量检测：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂
浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织样本，加 1mL 生理盐水研磨，粗提液全部转移到 EP 管中，8000rpm，常温离心
10min，上清液待测。
② 液体样品：澄清的液体可直接检测；若浑浊则离心后取上清液检测。
③ 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 生理盐水研磨，
超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000rpm 常温离心
10min，取上清待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min，设置温度在 37℃，设定波长到 546nm。
② 所有试剂解冻至室温，在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（
μL）
测定管
空白管
（仅做一次）
标准管
（仅做一次）
样本
4
蒸馏水
4
标准品
4
试剂一
200
200
200
混匀，37℃孵育 5min，于 546nm 处读取吸光值 A1。本试剂盒仅供科研使用
2
试剂二
50
50
50
混匀，37℃孵育 10min 后于 546nm 处读取吸光值 A2，
△A=A2-A1。
【注】：1. 若△A 值大于 0.5，须用生理盐水或蒸馏水对样本进行稀释，稀释倍数 D 代入计算公式。
2. 若△A 的值小于 0.005，可增加样本加样体积 V1（如由 4μL 增至 10μL，空白管也由 10μL
增至 14μL 蒸馏水，标准管也由 4μL 增至 10μL；其他试剂均保持不变），则改变后的 V1 代
入公式重新计算。
五、结果计算：
1、按照质量计算：
游离脂肪酸(NEFA)(μmol/g)=(C 标准×V2)×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空)÷(V1÷V×W)×D
=(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空) ÷W×D
2、按照体积计算：
游离脂肪酸(NEFA)(mmol/L)=(C 标准×V2)×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空)÷V1×D
=(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空)×D
3、按细胞数量计算：
尿酸含量(nmol/104 cell)=(C 标准×V1) ×103×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)÷(500×V1÷V)×D
=2×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ΔA 标准-ΔA 空白)×D
C 标准---标品浓度，1mmol/L=1μmol/mL；
V1---加入样本体积，0.004mL；
V2---加入标准品体积，0.004mL；
V---提取液体积，1mL；
W---质量，g；
500---细胞数量，万；
D---稀释倍数，未稀释即为 1。
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游离脂肪酸含量(FFA)(酶法)试剂盒,微板法
￥770 - 1290
