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小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒

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  • 2025年12月04日
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      上海晅科生物科技有限公司

    • 库存

      57

    • 样本

      组织、水样、血清、血浆及相关液体样本

    • 标记物

      hrp辣根过氧化物酶

    • 适应物种

      人、小鼠、大鼠、兔、植物....

    • 应用

      科研

    • 检测方法

      酶联免疫法

    • 检测范围

      详询

    • 规格

      48T/96T

    小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒使用说明书

    本试剂盒仅供研究使用。
    使用目的:
    本试剂盒用于测定种属血清,血浆及相关液体样本中前列腺酸性磷酸酶(PAP)含量。
    实验原理
    试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
    小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒组成

    1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
    2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(32ng/L) 0.5ml×1瓶
    3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
    4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
    5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
    6 显色剂B液 6ml×1瓶 12 密封袋 1个

    标本要求
    1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
    2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    试剂盒相关图片:
    产品细节图片1产品细节图片2
    操作步骤
    1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

    16ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
    8ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
    4ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
    2ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
    1ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
    4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    7.温育:操作同3。
    8.洗涤:操作同5。
    9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
    10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    操作程序总结:
    产品细节图片3

    计算
    以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
    产品细节图片4产品细节图片5

    小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒注意事项
    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物请避光保存。
    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒保存条件及有效期
    1.试剂盒保存:2-8℃。
    2.有效期:6个月

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