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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
28
- 英文名:
B16-F1
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| B16-F1细胞 | T25瓶 | LZ-X8659 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 2V6.11 人胚细胞 | 4甲氧基2... 4Methoxy2(trifluoromethyl)benzaldeh... 1063361 1G 通用试剂 |
| 人膀胱平滑肌细胞培养试剂盒 人膀胱平滑肌细胞培养试剂盒 试剂盒 | VANCOMYCINxy7noCHLORIDE盐酸万古霉素美国药典级250MG039Frozen |
| PA317(小鼠成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 | 营养琼脂(NAP)[肉汤琼脂平板][空气平皿]70mm |
| BEL-7402(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | HAV1Gm(甲肝)50片/盒RT |
| 人透明细胞癌细胞 英文名称: ES-2 | 疏水烷100u保存:20℃ |
| SF767(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | 肠膜明聚糖亚种 支/瓶 |
| CCC-HSF-1 人皮肤成纤维细胞 1ml/T75 | 漆酶shēng huà shì jì容量:RT100克 |
| 小肠隐窝上皮细胞 1×106 5×106 | 星状诺卡氏菌 英文名; Nocardia asteroides 规格; 冻干粉 唾液乳杆菌 Lactobacillus salivarius 冻干粉 37℃;48-72h;厌氧; 东方伊萨酵母 Issatchenkia orientalis Kudrjanzev 模式菌株 yes 30℃;2-3天;好氧; |
| 293 人胚细胞 | 12112 BCYE 琼脂基础 100g/瓶 用于军团菌选择性分离,每 100ml培养基中添加 1 支 22104 incubation media 12112 BCYE 琼脂基础 100g/瓶 用于军团菌选择性分离,每 100ml培养基中添加 1 支 22104 |
| FaDu 人咽鳞癌细胞 | N乙酰基4酮 1Acetyl4piperidone,% 31061 1ML 通用试剂 |
| CLIAKitforu-T3(HumanUlasensitivityi-iodothyronine)ELISAKit人高敏三甲状腺原氨酸规格:48T/96T | GiemsaStain 1g/5g/25g原装 Amresco 09 |
| 肝星形细胞 1×106 5×106 | 人血纤维蛋白原100克 |
| B16-F1细胞U937(U-937) 人组织细胞淋巴瘤细胞 1ml/T75 | 糖化酶10克RT |
| 冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒(含HRP一抗)10次 | 橙黄IVshēng huà shì jì容量:2~8°C100克 |
| 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3 | mEC肉汤250g用于0性增菌(USDA-FSIS方法) |
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文献和实验细胞增殖快非常好养,但是要及时换液,否则也很容易死亡、或变形。我养的最好的时候,天天都在换液,两三天就要消化传代。我用的消化液一般是 消化用含EDTA的胰酶0.25%,个人感觉效果比较好一点。消化步骤:吸出培养液,加入PBS洗涤(视培养瓶大小加入相应的量,25CM加入1-2ML)而后加一次胰酶(25CM培养瓶加0.6ML)作用2-3分钟,轻轻摇晃使均匀作用在细胞层面上。要一直在显微镜下观察,以防消化过头,等细胞从梭形变成椭圆形(或是棱角变钝),本来连成片的细胞之间开始有小小的空间,细胞与细胞
B16鼠黑色素瘤细胞。好像这株细胞还有亚型的,不过中科院说不清,我也就说不清了。总之是B16。细胞总的来说比较好养,操作基本都是常规的。要求用胎牛10%1640、5%CO2、37度培养,一段时间为了省钱用过新生牛也不错。但是传代多了,细胞有形态改变。可以弃掉重新复苏。血清国产的杭州四季青,感觉不灭活比灭活要好养一些。传代操作,主要是无菌操作。细胞增殖快非常好养,但是及时换液,否则也很容易死亡、或变形。消化用胰酶0.25%,可以用含EDTA的,效率更高一点。消化步骤:弃血清——用D-hank's
了垂体单位在肿瘤免疫中的作用。为此构建了皮下移植瘤小鼠模型并检测了垂体激素的水平变化,皮下移植的细胞系包括免疫检查点疗法耐药的细胞系(LLC 肺癌细胞和 GMCSF 过表达的 B16F10 黑色素瘤细胞)和免疫检查点疗法敏感的细胞系(MC38 结肠癌细胞系和 MCA205 纤维肉瘤细胞)。结果发现,荷瘤小鼠模型血清中 α 促黑激素(α-MSH)的产生明显增加(图 1 A,B)。阿黑皮素原(POMC)经加工可产生 α-MSH,且正常情况下 POMC 主要在垂体中表达(图 1 C)。相比于对照组小鼠
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