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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 英文名:
pML-EnCMV-Lon(ecoli)-6×His-SV40-Neo
- 库存:
999
- 供应商:
圻明生物
- 规格:
管
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pML-EnCMV-Lon(ecoli)-6×His-SV40-Neo圻明公司现货供应,可按客户需求单独构建载体,
一、载体构建:
(1)目的DNA片段和载体的制备;
(2)目的DNA片段和载体的连接;
(3)连接产物的转化;
(4)克隆筛选。
(5)测序验证及目标质粒交付
二、详细内容
1、以PCR扩增为基础的各类载体构建,如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体;报告基因载体等;
2、基因定点突变,包括单点突变,多点突变,基因缺失等;
3、载体元件替换和改造;
4、siRNA载体和miRNA表达载体构建;
5、过表达载体构建。
详询客服。公司整合了国外数个基因库资源,具有以下优势:
种属齐全:人、小鼠、大鼠、其它种属;
数量众多:多达几万数量cDNA克隆(cDNA模板质粒)和ORF克隆(ORF表达质粒);
质量优异:保证目的基因序列正确,无氨基酸突变,每个克隆质粒均可提供相应的测序报告;
价格实惠:与您亲自调取基因相比,我们的服务让您更加省时、省力、省心;
pCR-XL-TOPO-ZNF236(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
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文献和实验相关专题 蛋白表达技术全攻略 一、原理 1、E .coli 表达系统 E .coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E .coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质,将表达样品进行SDS-Page 以检测表达蛋白质。 2、外源基因的诱导表达 提高外源基因表达 水平的基本手段之一,就是将宿主菌的生长与外源基因的表达分成两个阶段,以减轻宿主菌的负荷。常用
需要不断添加?我自己的资料很有限,这个问题无法得到解决,现在想请你们帮忙,不知道你们有什么好的见解,谢谢! 此信还想向你们请教几个问题,烦请帮忙回答,感激不尽! 是这样的,我现在做一个人的营养蛋白的表达,目的在于将来能够产业化。这个蛋白比较特殊,成熟蛋白136aa,有20%的密码子属于ecoli稀有密码子,该蛋白理论分子量15KD左右,pI9.5,亲水性较强。并且活性结构是同源二聚体,分子内有三对链内二硫键,两个分子之间靠一对分子间二硫键形成同源二聚体。利用pet的各种表达
) and are available for public distribution upon request (http://shigen.lab.nig.ac.jp/ecoli/strain/nbrp/resource.jsp ).
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