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999
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武汉赛奥斯生物科技有限公司
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- 品系:
原代细胞
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- 物种来源:
大鼠
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- 细胞形态:
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- 运输方式:
常温/干冰
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- 生长状态:
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- 规格:
5×10⁵cells
大鼠原代大隐静脉内皮细胞
产品编号:PC-224r
产品规格:>5×10⁵cells
包装规格:1mL冻存细胞悬液或T-25培养瓶
一.细胞描述
大隐静脉起于足背静脉弓内侧端,经内踝前方,沿小腿内侧缘伴隐神经上行,经股骨内侧髁后方约2cm处,进入大腿内侧部,与股内侧皮神经伴行,逐渐向前上,在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔,汇入股静脉。
内皮细胞层是血液和其它组织的天然屏障。内皮细胞功能病变是造成动脉粥样硬化的主要原因。内皮细胞同时会合成和分泌凝血和纤维蛋白溶解系统的增强和抑制物,以及影响血小板粘附和聚集的媒介物。它们同时也会分泌控制细胞增殖的蛋白来维持血管壁的健康。内皮细胞会分泌t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及响应TNF-α,继而分泌细胞因子GM-CSF,表达ICAM-1表面抗体,产生大量的NO和endothelin。原代内皮细胞的体外培养系统有助于在特定的体外条件下研究血管内皮细胞的功能。
二.细胞特性
1) 细胞来源于实验动物正常的大隐静脉组织;
2) 细胞鉴定:小板-内皮细胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免疫荧光染色为阳性;
3) 经鉴定细胞纯度高于90%;
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌;
5) 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
三.培养建议
大鼠原代大隐静脉内皮细胞的体外培养周期有限,建议使用本公司原代细胞专用培养基和正确的培养方法来培养,以此保证细胞具备良好的增殖和分化能力。推荐使用:内皮细胞培养基(货号:PM-002)。
| 名称 |
体积 |
浓度 |
保存条件 |
| 内皮细胞基础培养基 |
500mL |
1× |
4℃、避光 |
| 内皮细胞培养添加剂 |
5mL |
100× |
-20℃、避光 |
| 胎牛血清(FBS) |
25mL |
终浓度5% |
-20℃、避光 |
| 青霉素-链霉素(双抗,P/S) |
5mL |
100× |
-20℃、避光 |
四.细胞运输和保存
1) T25瓶形式:培养瓶充满完全培养基后进行常温运输。收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
2) 冻存管形式:1mL冻存细胞悬液装于1.8mL的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输。收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
五.产品用途
本产品仅供实验室研究使用,不可用于动物或人类治疗或诊断用途。
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文献和实验Zhao D, Zhao H, He Y, et al. BMSC reduces ROS and inflammation levels by inhibiting TLR4/MYD88/NF-κB signaling axis to alleviate dry eye[J]. 2023.
体外培养模型已被广泛应用于血脑屏障的研究、脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究、新药筛选、脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究等领域。而大多数体内实验采用大鼠为动物模型,而且大鼠具有较多的细胞生物学研究所需的抗体可用,因此进行大鼠脑微血管内皮细胞的培养具有重要的意义。自从Panula等[2]首次成功培养大鼠脑微血管内皮细胞以来,国内外有关大鼠脑微血管内皮细胞的分离和培养方法已有较多的报道,我们发现国内的方法多以组织匀浆、两次尼龙网过滤分离脑微血管段为主[3,4],也有采用酶消化、梯度离心及尼龙网过滤
本人总结了下大鼠内皮细胞的培养方案 一,消化法。优点:获得的细胞比其他方法纯。缺点:获得细胞比较少。 常见问题及解决方法:1.消化的时间不好控制时,建议大家分两段时间消化,消化30分钟时收取消化液放入一个离心管,30分到45分钟段收集的放入另一离心管,离心后看看第二管是否有杂细胞,若没有就把两管混合用,若有就只用第一管的。2.消化液,我的经验是5份0.2%胶原酶和1份0.125%胰酶。3.若很难消化时,可以磁力搅拌消化。注意消化法时结扎一定要紧! 二,植快法。优点:获得细胞
材料与方法: 材料 : 培养皿、培养瓶、烧瓶、试管,玻璃针等。 眼科剪、眼科镊、手术刀片。 5%CO2孵箱、PH计。 恒温水浴箱。 PMi1640培养基,D-Hank’s缓冲液 、胎牛血清,内皮生长因子(ECGF),青霉素,链霉素,戊巴比妥钠等。 方法: 1、取材:4~6wWistar大鼠, 大剂量2%戊巴比妥钠麻醉处死,将处死后的大鼠浸入75%酒精中,放入超净台。在无菌状态下剪开胸腹腔,分离胸主动脉,用2ml注射器从主动脉弓处向胸主动脉注入D-Hank’s液,驱除残血,取
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