猪胰蛋白酶8X（胰粉）

胰蛋白酶的提取

溶液用于测定激活前的蛋白含量及酶活性。原溶液中加入5mg结晶胰 蛋白酶 ，轻轻搅拌均匀，25℃放置2～4h，或4℃放置12～16h，使胰 蛋白酶 原活化。每隔1h取样测定胰蛋白酶活性增长情况，直至酶激活速度变慢或停止增长。一般比活可达到3 500～4 000 BAEE单位/mg。留取2mL溶液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。激活酶溶液用2mol/L硫酸调pH至2.5～3.0，滤纸过滤，滤去硫酸钙沉淀，收集滤液，4℃保存备用。方法二称取冷冻猪胰脏100

蛋白质提取

质特别优越，一方面是因为丁醇亲脂性强，特别是溶解磷脂的能力强；另一方面，丁醇兼具亲水性，在溶解度范围内不会引起蛋白质的变性失活。另外，丁醇提取法的pH及温度选择范围较广，也适用于动植物及微生物材料。 三、蛋白质提取举例——胰糜蛋白酶的制备 【实验目的】 掌握从组织中制备胰糜蛋白酶的原理和方法。 【实验原理】 胰糜蛋白酶是胰腺产生的一种消化酶。最初以酶原的形式被合成与分泌，之后在胰蛋白酶的作用下被水解而激活。胰糜蛋白酶是一种催化肽键的肽链内切酶，主要切断色氨酸、苯丙氨酸或酪氨

胰蛋白酶的提取实验原理/试剂配制/步骤

，4℃保存备用。 方法二 称取冷冻猪胰脏100g，在2～5℃下解冻，切成小块，用组织捣碎机中绞碎成胰浆，在5～10℃存放24h以上，使胰酶自身活化。胰浆中加入25%(质量分数)乙醇溶液250mL(25%乙醇溶液中加0.015mol/L HCl 、0.05mol/L CaCl2)，捣碎机中捣碎1min。胰浆倒入500mL烧杯中，间隙搅拌，温度20℃左右，活化5～6h。每隔1.5h，吸取2mL活化液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。 活化反应结束后，胰浆3 500