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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
91
- 英文名：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
产品名称：转基因品系油菜GT200染料法qPCR试剂盒
产品规格：50T
保存及有效期：请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：样品模板
产品特点：
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
转基因品系油菜GT200染料法qPCR试剂盒包装规格及成分（具体信息详见说明书）：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 说明书 |
使用手册 | 1 份 |
转基因品系油菜GT200染料法qPCR试剂盒注意事项：
1.所有操作严格按照说明书进行；
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外，qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况： 1. 复孔间重复性差怎么办？ 复孔间重复性差一般会有以下两种情况： （1）CT 值很大，如 CT≥ 30，重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布，即在有效模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性，直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法：如果融解曲线没有杂峰，无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上，那 CT 值为准确的，可多设置
在染料法RT-qPCR实验中，难免会遇到一些奇怪的扩增曲线或熔解曲线，不管是开辟新课题新项目中的预实验探索还是持续验证中的反复测试，都有可能遇见。为此小翌整理出来常用的SYBR Green染料法RT-qPCR实验的几个常见问题，并给出了可能的原因和解决方案，希望大家能够顺利度过RT-qPCR大关。 一.扩增曲线异常 正常的扩增曲线一般呈S型，一般建议有效 Ct 值控制在15‑30，特殊低丰度基因 Ct 可适当放宽。异常的扩增曲线包括Ct值偏大，扩增曲线无平台期、曲线呈锯齿状等现象。 1.Ct
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP 检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。 在 Real-time qPCR 技术的发展过程中，定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年，美国 PE 公司（已经并入 Invitrogen 公司）成功研制了 Taqman 技术，1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过 Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有 ABI
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