- 询价
- 2025年07月14日
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
武汉纳博生命科技有限公司
- 服务名称：
羊驼VHH天然文库
纳博生命构建的羊驼VHH天然文库，里面包含了来自不同羊驼个体的VHH基因的多样性序列，只需客户提供抗原，就可以直接进行筛选。 天然文库的优势在于：周期短、库容大、品质高。库容达1.3*1011cfu/mL，库品质高，2-3周即可获得特异性好的纳米抗体序列。适用于对羊驼有毒性的抗原以及低免疫原性的抗原。
羊驼VHH天然文库构建，第一步是PBMC的分离，以下是步骤和流程。
1)往已加入抗凝血剂的静脉外周血中加入等体积的D-PBS稀释，混合均匀。
2)将淋巴细胞分离液注入密度梯度离心管，每管注入15mL。
3)保持密度梯度离心管垂直，通过血清移液管将稀释的静脉外周血沿着管壁加入。PBMC样品会和隔板上方的分离液混合，但不影响分离效果。
4)使用水平转子离心机，在开启离心机制动器的情况下，室温1200g离心10分钟。
5)离心完成后，将密度梯度离心管中最上层不含细胞的血浆和D-PBS稀释液吸出，保留5 mL血浆用作效价检测。
6)缓慢吸出包含淋巴细胞的上层稀释液至新的无菌离心管中，添加1倍体积的D-PBS，室温1000g离心10分钟洗涤细胞。
7)离心完成后，弃去上清，将底部沉淀得到的PBMC置于-80℃超低温冰箱冻存。
噬菌体表面展示文库构建流程介绍
噬菌体表面展示文库构建流程包括：总RNA提取、反转录、PCR扩增、酶切与连接、电转化TG1感受态细胞、到最后的收集文库。
噬菌体表面展示文库构建——实验过程简述
| 步骤 | 流程 | 结果 |
| 1 | 总RNA提取 | 合并全部提取得到的PBMC，使用柱吸附法提取总mRNA |
| 2 | 反转录 | 以提取得到的总mRNA为模板，反转录得到cDNA |
| 3 | PCR扩增 | 使用适当的DNA引物，以上述cDNA为模板，经聚合酶链式反应（PCR）扩增得到羊驼免疫球蛋白IgG2和IgG3的VHH片段，即纳米抗体的DNA片段 |
| 4 | 酶切与连接 | 载体酶切：双酶切制备线性化的噬菌体表面展示筛选载体DNA质粒。 片段酶切：双酶切VHH的DNA片段。 连接载体与片段：使用T4 DNA连接酶连接酶切后的载体与片段，得到完整的VHH噬菌体表面展示筛选质粒文库，即VHH－ｐIII融合蛋白表达载体质粒文库。其中，ｐIII是存在于噬菌体表面鞭毛上的蛋白质。 |
| 5 | 电转化TG1感受态细胞 | 将DNA连接产物经电转化方法，转化至TG1大肠杆菌感受态细胞，共电转96份连接产物。 |
| 6 | 收集文库 | 适当培养收集后的全部菌落，即为免疫羊驼的纳米抗体文库。期间使用梯度稀释法计量电转后之后、培养前的文库大小，约1.56×109cfu. |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验丰富，可构建多种类型的噬菌体免疫库和天然库（scFv、Fab、VHH等）。 2. 筛选：普健自有噬菌体天然抗体文库，序列正确性高，来源丰富，库容大。 3. 筛选通量高，已成功交付多例建库及筛选项目，客户分布于欧洲及亚洲。 4. 载体带有His标签，可直接用于表达抗体，方便抗体纯化验证。 5. 现已成功开发出兔scFv天然噬菌体文库产品：ATA-Rabbit Naïve ScFv I（库容：1.09×1010 pfu）。 经兔scFv天然库筛选出的序列，拼接成全长IgG重组
纳米抗体 (nanobody,Nb)， 即重链单域抗体 VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody) ，该类抗体只包含一个重链可变区 (VHH) 和 CH2，CH3 区，相比于其他抗体，轻链天然缺失。纳米抗体晶体直径 2.5nm，长 4nm，是自然存在的可以和抗原结合的最小片段。 纳米抗体类型纳米抗体和传统抗体的优劣对比 性能 传统抗体 纳米抗体 抗体
性抗体，其筛选周期短，操作简单，应用范围广，可获得人源化抗体。 普健生物噬菌体展示抗体库技术平台 1.丰富的噬菌体抗体技术经验，5年以上噬菌体抗体开发，交付上百个噬菌体展示抗体开发项目 2.具有全人源重组抗体库，库容高达千亿级别(10∧11pfu)，两步建库法，保证了文库的多样性，抗体库片段插入正确率高;可以两周拿到全人源重组抗体 3.可以构建多物种(人源、小鼠、兔子、羊驼、鸡、狗、猴等)抗体文库 4.可以构建多种类型(scfv、Fab、VHH 等)的抗体文库
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
