β-1,3-1,4-葡聚糖酶活测定试剂盒,微板法

价格￥1420

品牌wksubio
货号WS4750W
产地国内
更新日期2026年10月14日

13 年金牌会员

详细信息
文献和实验
技术资料

库存：
大量
英文名：
β- 1,3-1,4-glucanase activity assay kit
CAS号：
WS4750W
保质期：
3个月
供应商：
上海瓦兰生物
保存条件：
4℃
规格：
96T

本试剂盒仅供科研使用

β-1,3-1,4-葡聚糖酶（β-1,3-1,4-glucanase）酶活试剂盒说明书

（货号：WS4750W 微板法 96 样）

一、产品简介：

β-1,3-1,4-葡聚糖酶（又称地衣多糖酶；EC 3.2.1.73）是一类重要的水解酶，可以水解谷物

中的β-1,3-1,4-葡聚糖，其在食品、饲料和纺织等领域的具有重要应用价值。

β-1,3-1,4-葡聚糖酶水解底物葡聚糖产生还原性糖。利用 3,5-二硝基水杨酸测定还原糖的

量，在 540nm 读取吸光值，进而得出β-1,3-1,4-葡聚糖酶的活性大小。

二、试剂盒组成和配制：

液体 120mL×1 瓶

液体 30mL×1 瓶

粉剂 mg×1 支

临用前甩几下使粉剂落入底

部，再加 1.1mL 蒸馏水，80℃

水浴 10min 充分溶解，冷却至

室温待用。

液体 30mL×1 瓶

粉体 mg×1 支

若重新做标曲，则用到该试剂

三、所需的仪器和用品：

酶标仪、96 孔板、可调试移液器、台式离心机、水浴锅、移液器、研钵、冰和蒸馏水。

四、β-1,3-1,4-葡聚糖酶（

β-1,3-1,4-GA）活性测定：

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验

样本和试剂浪费！

1、样本制备：

① 组织样本：

取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.5g）到研钵内，加入 1mL 提取液，在冰上进

行冰浴匀浆或者液氮研磨。12000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

[注】：也可以按照组织质量（

g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例提取。

② 细菌/真菌样本：

先收集细菌/真菌到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌/真菌加入 1mL 提取液；

冰浴超声波破碎细菌/真菌（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；

12000rpm， 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

【注】：也可按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。

③ 液体样本：若是澄清液体，直接检测，若液体样本浑浊，需 4℃×12000rpm，离心 10min，

取上清液检测。

2、上机检测：

① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm。

② 所有试剂解冻至室温（25℃），在 EP 管中依次加入：

试剂名称（

混匀，37℃孵育 30min

150本试剂盒仅供科研使用

混匀，95℃水浴 5min，取出后用自来水或冰水冷却至室温，

取 200μL 澄清液体于 96 孔板中，在 540nm 处读取吸光值

A，ΔA=A 测定管-A 对照管（每个样本做一个对照管）。

【注】:若ΔA 在零附近徘徊，可在样本制备时加大取样质量 W（如增至 0.5g）,或在上机检测

时加大上样量 V1（由 50μL 增加到 100μL，则试剂一相应减少，保持总体积不变），

或延长反应时间 T（如增至 60min）,则改变后的 W、V1 和 T 需带入计算公式重新计算。

五、结果计算：

1、标准曲线方程：y = 0.0123x - 0.035；x 为标准品浓度（

μg），y 为ΔA。

2、按蛋白浓度计算：

酶活定义：每毫克组织蛋白每分钟分解葡聚糖产生 1μg 还原性糖定义为一个酶活性单位。

β-1,3-1,4-GA(μg/min/mg prot)=[(ΔA+0.035)÷0.0123]÷(V1×Cpr) ÷T

=54.2×(ΔA+0.035)÷Cpr

3、按样本鲜重计算：

酶活定义：每克组织样本每分钟分解葡聚糖产生 1μg 还原性糖定义为一个酶活性单位。

β-1,3-1,4-GA(μg/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.035)÷0.0123]÷(W×V1÷V) ÷T

=54.2×(ΔA+0.035)÷W

4、按细菌/真菌数量计算：

酶活定义：每 1 万个细菌或真菌每分钟分解葡聚糖产生 1μg 还原性糖定义一个酶活性单位。

β-1,3-1,4-GA(μg/min /104 cell)=[(ΔA+0.035)÷0.0123]÷(500×V1÷V) ÷T=0.11×(ΔA+0.035)

5、按液体体积计算：

酶活定义：每毫升液体中每分钟分解葡聚糖产生 1μg 还原性糖定义一个酶活性单位。

β-1,3-1,4-GA(μg/min/mL)=[(ΔA+0.035)÷0.0123]÷V1÷T=54.2×(ΔA+0.035)

V---提取液体积，1mL；

V1---样本上样体积，50μL =0.05mL；

T---反应时间，30min；

W---样本鲜重，g；

500---细菌/真菌总数，500 万；

Cpr---样本蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。

附：标准曲线制作过程：

1 制备标准品（1mg/mL）：从标准品管中称量取出 2mg 至一新 EP 管中，再加 2mL

蒸馏水混匀溶解即 1mg/mL 的葡萄糖（母液需在两天内用且-20℃保存）。

2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. mg/mL。也可

根据实际样本来调整标准品浓度。

3 依据 50μL 标准品+150μL 试剂一+150μL 试剂三，混匀 95℃水浴 5min，取出后用自

来水或冰水冷却至室温，取 200μL 澄清液体于 96 孔板中，在 540nm 处读取吸光值

A，根据结果即可制作标准曲线。

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文献和实验

β-1,3-1,4-葡聚糖酶（β-1,3-1,4-glucanase）酶活试剂盒说明书

144 人阅读发布时间：2023-08-16 09:58

β-1,3-1,4-葡聚糖酶（β-1,3-1,4-glucanase）酶活试剂盒说明书微板法

140 人阅读发布时间：2023-08-16 09:58

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