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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
Endonuclease VIII (10 U/μL)
- 保质期:
一年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
1000 U(14536ES80)/5000 U(14536ES90)
| 规格: | 1000 U(14536ES80) | 产品价格: | ¥625.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5000 U(14536ES90) | 产品价格: | ¥2565.00 |
产品简介
核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII)是一种DNA损伤修复酶,有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在AP位点切割磷酸二酯键,产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。核酸内切酶 Ⅷ识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。
产品信息
| 货号 | 14536ES80/14536ES90 |
| 规格 | 1,000 U/5,000 U |
| 酶活 | 10 U/μL |
| 失活条件 | 75℃孵育10 min |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 14536ES80 | 14536ES90 |
| 14536-A | Endonuclease VIII | 100 μL | 500 μL |
| 14536-B | 10 × Endonuclease VIII Reaction Buffer | 1.5 mL | 1.5 mL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用方法
1) 反应体系
| 组分 | 体积(μL) |
| 10×Endonuclease VIII Reaction Buffer | 5 |
| 含AP位点的dsDNA | X (20 pmol) |
| Endonuclease VIII | 1 |
| ddH2O | To 20 |
*含AP位点的dsDNA可由退火后的双链添加UDG(Cat#10304ES)水解制备。
2) 反应条件:充分混匀,37℃反应30~60 min。
注意事项
1. 本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途。
Ver.CN20230809
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文献和实验Partial Endonuclease Digestion
, tubes 2 through 4 contain 20 µl, and tube 5 contains 10 µl (see diagram below). Place the tubes on ice. Add restriction endonuclease (3-10 units of enzyme per µg of DNA) to tube 1, mix quickly, and place the tube on ice. Add 10 µl
Partial Endonuclease Digestion
2 through 4 contain 20 µl, and tube 5 contains 10 µl (see diagram below). Place the tubes on ice. Add restriction endonuclease (3-10 units of enzyme per µg of DNA ) to tube 1, mix quickly, and place the tube on ice. Add 10 µl from tube 1 to tube 2, mix quickly
酶切反应(Setting Up a Restriction Endonuclease Reaction)
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶的用量,对许多酶来说,相应延长反应时间(不超过16小时)也可完全反应。二、 选择正确的酶不言而喻,选择的酶在底物DNA上必须至少有一个相应的识别位点。识别碱基数目少的酶比碱基数目多的酶更频繁地切割底物












