- ￥365 - 1500
- 翌圣生物（Yeasen）
- 11151ES
- 上海
- 2025年11月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR
- 保质期：
一年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-25~-15℃保存
- 规格：
10 T(11151ES10)/100 T(11151ES60)
| 规格： | 10 T(11151ES10) | 产品价格： | ￥365.00 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100 T(11151ES60) | 产品价格： | ￥1500.00 |
产品简介
Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR是Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR的升级版，在满足了可在同一管中进行反转录和基因组去除两个反应的同时，既简化了反应过程、大幅缩短了反应时间，又提高了反转录产物的产量。本产品4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix中含反转录反应所需的全部试剂，反应时只需加入gDNA Remover Mix、模板RNA和水即可高效地合成第一链cDNA，同时去除基因组DNA污染。本产品适合具有复杂的RNA模板的反转录，也非常适合少量模板以及低拷贝基因的反转录。
本产品反转录产物兼容探针法与染料法qPCR，探针法与染料法qPCR Mix分别推荐翌圣Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211)和Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184)，进行高性能基因表达分析。本产品反转录产物不适用于后续基因克隆等长片段扩增，如果需要，推荐翌圣Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149、Cat#11150)进行高效反转录。
产品信息
| 货号 | 11151ES10/11151ES60 |
| 规格 | 10 T/100 T |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 11151ES10 | 11151ES60 |
| 11151-A | 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 50 μL | 500 μL |
| 11151-B | gDNA Remover Mix | 10 μL | 100 μL |
| 11151-C | RNase-free Water | 1 mL | 2×1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用说明
- 在冰上融化11151-A/B/C组分，将试剂各组分充分震荡混匀，并在RNase-free离心管中配置如下体系：
| 组分 | 体积 （μL） |
| RNase-free Water | To 20 μL |
| 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 5 μL |
| gDNA Remover Mix | 1 μL |
| Total RNA | 10 pg -5 μg* |
| or mRNA | 10 pg-500 ng* |
表1 反应体系
*建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。
- 反应程序
| 温度 | 时间 |
| 37℃ | 5 min* |
| 85℃ | 30 s |
表2 反应程序
*该过程包含反转录及gDNA消化。
- 反转录产物可立即用于qPCR反应，也可-20°C短期保存，长期保存建议分装后于-80°C存放，避免反复冻融。
注意事项
1.所有操作均应在冰上进行，且操作过程应避免RNase污染。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3.本产品仅作科研用途！
Ver.CN20230530
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文献和实验大家一臂之力，里面包含单独成管的 Oligo (dT)20VN 及 Random hexamers，可以根据模板类型和后续实验需求灵活选择或按比例混和；还有 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)（R323），包含逆转录反应所需的所有组分，当然 Random primers 和 Oligo (dT)20VN 的混合引物也直接在这管 SuperMix 中，只需加入模板 RNA，20 min 内即可完成逆转录反应，极为方便！ 第三个选择就是基因
完整性分析。 二、基因组 DNA 的去除 某些情况下，痕量基因组 DNA（gDNA）可能与 RNA 共同被纯化。污染 gDNA 可能会干扰反转录结果，导致 RT-qPCR 等高灵敏度实验出现假阳性、高背景或检测率降低。 为去除 gDNA，通常在 RNA 分离过程中加入 DNase I。在进行 RT-(q)PCR 之前，必须完全去除 DNase I，因为任何残留的酶都会使单链 DNA（如引物和 cDNA）降解。通常，DNase I 失活（如，EDTA 和加热处理）或酶去除步骤会导致 RNA
的动态范围或线性度最佳，可确保基因表达定量的准确性。 所选试剂在扩增过程中应产生较高且一致的 cDNA 得率，以获得具有高灵敏度和低变异性的基因表达结果。可考虑预混液形式的逆转录酶用以可以减少实验误差。 RT-qPCR 的一个特殊程序是从未经 RNA 分离的粗细胞裂解物直接进行逆转录。在使用稀缺样本或选用群体内特定细胞的实验，可考虑使用直接 RT-qPCR 法来防止可能的样本损失和低 RNA 回收。 cDNA 克隆和文库构建 cDNA 文库可由代表特定样本中转录序列的 cDNA 克隆组成
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