- ￥525
- 翌圣生物（Yeasen）
- 13089ES50
- 上海
- 2025年11月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Hifair® V Multiplex One Step RT-PCR Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
50T
Hifair® V Multiplex One Step RT-PCR Kit是以RNA为模板进行多重PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer、Enzymes Mix等，缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重PCR反应扩增效率的因子，能够保证引物扩增效率的同时，进行多达八重的反应。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
| 13089ES50（50T） | 13089ES60（100T） | ||
| 13089-A | 2×Hifair® V MP Buffer | 500 μL | 1 mL |
| 13089-B | Hifair® V Enzyme Mix | 75 μL | 150 μL |
| 13089-C | RNase Free H2O | 500 μL | 1 mL |
- Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作
反应体系（以20 μL为例）
【注】：使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
- 引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。
c) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
| 反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
| 1 | 逆转录 | 50℃a | 15 min | 1 |
| 2 | 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 3 | 扩增反应 | 95℃ | 15 sec | 35 |
| 60℃b | 5 min |
- 退火/延伸的时间可根据扩增长度进行调整，扩增速度1 kb/min
HB200913
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文献和实验Two-Step RT-PCR protocol We will provide both one-step and two-step protocols for RT -PCR . We recommend the two-step protocol for this class. In the one-step protocol, the components of RT and PCR are mixed in a single tube
是因为荧光标记得影响），要看你摸的时候不同循环的扩增产物的量之间的关系，在相邻之间的差异基本复合线性增长才是线性期。 一步法还是二步法:我一直不建议采用一步法，因为逆转录酶很贵，就坐一次PCR，多可惜啊！还有RNA。而且反转录了之后可以做10－20次，还可以摸条件找原因。不要以为一步法是盒子，实际上是一样的，操作没有什么不同，还没办法摸条件，早该淘汰了（特指RT-PCR过程中）。对于少量的标本用1ug的反转录酶既可以了，或者用于预实验都是很好的，但是P的时候要多加一点，之所以这些话总是不确定是因为
SuperScript III One-Step RT-PCR System with Platinum® Taq High Fidelity
for 25 or 100 amplification reactions of 50 µl each. Note: This kit has been optimized for end-point RT-PCR. For quantitative real-time RT-PCR, use the SuperScript™ III Platinum® One-Step Quantitative RT-PCR System. 实验
