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- 供应商:
武汉科昊佳生物科技有限公司
- 库存:
99999
- 英文名:
Certified Fetal Bovine Serum Heat Inactivated
- 规格:
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【产品介绍】
胎牛血清是应用广泛的细胞培养添加物,其生长因子和蛋白质含量丰富。Vivacell品牌胎牛血清经过严格的质量控制筛选和验证标准,确保了产品质量,减少了批间差。Vivacell品牌胎牛血清均可溯源,生产质量体系符合cGMP要求,并通过ISO13485: 2016质量认证。
血清通常用作细胞生长的添加物,拥有多种功能和用途,如:富含大分子蛋白,低分子量的营养素,作为氨基酸、碳水化合物、维生素的额外来源;提高介质的缓冲能力;可结合或中和有毒成分;减少细胞氧化应激,减少细胞凋亡;提供促进生长的因子,有助细胞适应环境。
血清热灭活是通过提高血清温度到56℃并且保持该温度30分钟完成。热灭活可以破坏补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。
【适用范围】
特级胎牛血清用途比较广,适用于各种癌细胞株,人类胚胎肾细胞、白血病细胞、上皮细胞、成纤维细胞、黑色素瘤细胞、巨噬细胞以及部分原代细胞等娇贵细胞培养。
【使用方法】
血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),并置于2℃~8℃中使之融化,解冻过程中间歇地轻轻地摇晃均匀,待全部溶解后再分装或直接使用。完全融解的血清从4℃拿出,按要求比例(5%-20%)加基础培养基配置成完全培养基,建议其置于4℃冰箱存放并于1-2周内用完。
【有效日期】
详见产品标签
【储存条件及保质期】
应贮存在-10℃~-20℃,避免反复冻融;
有效期为5年。
【注意事项】
血清沉淀的物质主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),脂蛋白,冷凝集素,玻连蛋白,胎球蛋白,磷酸钙(显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。
哪些原因容易导致血清沉淀:
1. 温度改变太大,血清由-20℃直接放入37℃解冻,因温度改变剧烈容易导致沉淀。
2. 血清在室温或4℃冰箱放置时间太久,血清中的不稳定成分会被破坏,影响细胞生长效果;导致血清品质变差,也会产生沉淀。
3. 血清分装冻存时,注意在不产生气泡的情况下摇晃均匀,避免因血清成分浓度改变产生沉淀。
4. 血清灭活后容易产生沉淀,如需使用灭活血清,请按56℃,30分钟,轻微摇晃原则操作,灭活温度过高、时间过长、摇晃不均都容易产生沉淀。
5. 如有血清沉淀,分装后进行离心处理,建议400g离心5分钟,取上清使用。
【声明】
仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。
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文献和实验】每管1mL入冻存盒,-80℃过夜后转移至液氮气相长期保存。 注意:-70℃存放会导致活力丧失,不可长期置于-80℃。 四、关键注意事项 1.培养基与血清 (1)标准配方为RPMI-1640+10% FBS,为该细胞通用培养体系; (2)用于体内同源移植模型的细胞建议固定血清批号并使用优级胎牛血清(abs972-500mL/SV30302.03),批次更换前先做小规模平行验证; 2.脱落细胞与消化控制 (1)RAG部分细胞贴壁不牢,润洗与培养过程中均有脱落,脱落细胞须离心回收、与贴壁细胞合并传代
高糖 + 10%FBS + 1%P/S,保持条件一致; (2)血清质量直接影响细胞状态与病毒扩增滴度,建议使用优级胎牛血清(abs972-500mL/SV30302.03)并固定批号。 3.病毒实验要点 (1)CPS对弹状病毒(IHSV)敏感,感染12h即出现细胞病变、48h大量死亡,可用于病毒分离与滴度测定; (2)感染实验应使用状态一致的低代次细胞,接种密度均一以保证结果可重复; (3)病毒操作需在相应生物安全等级下进行,避免交叉污染。 4.形态与污染判断 (1)正常:上皮样/成纤维样贴壁生长,单层铺展
优级胎牛血清(abs972-500mL/SV30302.03);血清批次更换会改变生长速率,进而影响代次窗口的判断; (3)低氧培养(3% O2)可显著延缓MEF衰老——常氧(21% O2)下小鼠成纤维细胞的衰老本质是氧化应激;有条件的实验室建议使用三气培养箱。 2.密度窗口(该细胞的核心) (1)过疏提前衰老、过满提前老化—MEF需要适度接触才能维持生长态,但长满即触发接触抑制与衰老; (2)传代红线:汇合度70%-85%;推荐1:3-1:6或按3T3方案固定细胞数、固定节奏传代; (3)若细胞
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