真核表达载体

转染真核表达载体后需要将载体线性化吗

相关专题 总有一种转染方法适合你 问： 我是新手，我想将一个构建的真核表达载体转染 进HEK293细胞中，有人说要先将质粒线性化，也有人说不用，不知道到底应该怎样呢?如果需要线性化，具体怎么操作呢?谢谢了! 答： 要看你的目的，是做瞬时表达还是稳定表达，做稳定表达，为了更好的整合到细胞的基因组上，可将质粒线性化，选择好酶切位点。不酶切直接筛选稳定表达也可以得到结果。293转染 效率还是较高

【资源】各种原核和真核表达载体（总有一款适合你！）

一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性带His标签（N端）+TrxA(硫氧还蛋白)：PET-32

真核表达载体转染细胞后必须要筛选码？

ziputao：真核表达载体转染细胞后必须要筛选吗？如G418，不筛，直接做指标检测行吗，谢大侠指教！丁香园网友yangea认为：不一定，这是瞬时转染与稳定转染的区别。只要对所转入的基因能“可视”，达到检测的目的即可（如构建的载体连接有报告基因的情况）。按照转入目的基因的不同，瞬时转染可在12-72小时有表达，根据表达的峰值时间检测指标就可以了。