- ￥300 - 570
- 帛科
- BKS2092
- 国产
- 2026年05月21日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
6个月
- 供应商：
帛科
- 保存条件：
2-8℃冷藏
- 规格：
100管/96样/50管/48样
| 规格： | 100管/96样 | 产品价格： | ￥570.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50管/48样 | 产品价格： | ￥300.0 |
产品名称：谷氨酸合成酶（GOGAT）生化检测试剂盒
规格：100管/96样、50管/48样
产品分类：氮代谢系列
实验类型：微量法、紫外分光光度法
商品详情：
谷氨酸合成酶（GOGAT）生化检测试剂盒测定意义：
GOGAT广泛分布于植物中，和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环，参与氨同化的调控。GOGAT分为以NADH为还原剂的NADH-GOGAT和以铁氧还蛋白为还原剂的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT主要存在于叶绿体基质中，与光合作用和光呼吸有关，主要同化NO3-还原和光呼吸产生的NH4+。
测定原理：
Fd-GOGAT催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸，形成两分子的谷氨酸，谷氨酸脱氢酶催化谷氨酸的脱氢反应，同时产生NADH，使WST-8显橙黄色，在450 nm下测定吸光值。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体14uL×1支，4℃保存；
组织样本的前处理：
①总GAPDH酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体GAPDH酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆GAPDH酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中GAPDH酶活性。
建议测定总GAPDH酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH，则按照步骤②提取粗酶液。
细菌或培养细胞的前处理
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
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文献和实验亦称谷氨酰胺 -2-氧代（α酮）戊二酸氨基转移酶。缩写为 GOGAT。此酶可催化谷氨酰胺的胺基在 NAD（ P） H或还原型铁氧还蛋白的存在下，还原转移于α -酮戊二酸，生成 2分子谷氨酸： L-谷氨酰氨 α -酮戊二酸 [2H]→ 2L-谷氨酸也可以说是以谷氨酰胺的胺基为氨供体还原α -酮戊二酸为谷氨酸的酶。是含 Fe及 S的黄素酶， EC1， 4， 1， 13（ NADPH）， 1， 4， 1， 14（ NADH）， 1， 4， 7， 1（含铁氧还素
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