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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Puccinia pelargonii-zonalis Doidge
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
英文名称:Puccinia pelargonii-zonalis Doidge
荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。为此本公司开发了简单快捷的天竺葵锈病菌PCR试剂盒。

产品特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增天竺葵锈病菌。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
天竺葵锈病菌PCR试剂盒包装规格及成分:
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 |
天竺葵锈病菌PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 |
天竺葵锈病菌PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂:DNA 模板

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 天竺葵锈病菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 鲍疱疹样病毒 PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照(水) | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照(天竺葵锈病菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。

天竺葵锈病菌PCR试剂盒相关产品:
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 天竺葵锈病菌LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 天竺葵锈病菌PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
| 天竺葵锈病菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2490 |
| 天竺葵锈病菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
2990 |
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文献和实验后适当灌水,以提高田间湿度,利于锈菌孢子萌发、侵染和发病。 除上述二种方法以外,还可以用喷雾法,即将配成的孢子悬浮液喷在诱发行上进行接种。接种后为了有利于锈病孢子萌发、侵染,也要进行保湿。 接种后,约二周后即可发病。但成株的抗病性鉴定一般在小麦乳熟期以后,锈病发展到高峰时进行,每个品种逐个进行调查记载。 (二)抗锈性鉴定 1.幼苗鉴定 衡量小麦品种对锈病的抗病和发病程度,常用到反应型(感染型)、严重度和普遍率三个指标。幼苗期鉴定一般考察其反应型。反应型是指植株受病菌侵染后的保卫性反应
锈病菌类 锈病菌类 (rust disease fungi) 引起植物发生锈病的真菌。属锈菌目。已发现130多属,5000余种,分别是蕨类、裸子和被子植物的专性寄生菌。在自然条件下只能在活的寄主植物体上生长,寄主植物被锈病菌类侵染后,在叶片、叶鞘或茎上长出铁锈状的孢子堆,俗称黄疸。 锈病菌的发育既具阶段性又呈多形态,生活史中产生多种类型的孢子。小麦秆锈病菌是典型代表,一生中产生5种孢子,代表着发育的不同阶段(表1)。
、锈孢子、夏孢子、冬孢子及担孢子。性孢子着生在性孢子器上,代表配子阶段;锈孢子着生在锈孢子器上,为质配或二倍体阶段,孢子一般黄色或锈褐色;夏孢子着生在夏孢子器上,代表反复循环的无性生殖阶段;冬孢子器内着生冬孢子,为生活循环的末期,在此阶段发生配子结合及减数分裂;冬孢子于次春长出担子和担孢子。锈菌与寄主有严格的寄主-寄生体关系,某种锈菌仅寄生于某类寄主。已知约5000种,引起植物的各种锈病。 黑粉菌目 (Ustilginales) 亦为专性寄生,侵染多种单子叶、双子叶植物,尤以寄生
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