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文献和实验CATHY'S NO BOIL YEAST EXTRACTS
CATHY'S NO BOIL YEAST EXTRACTS 1.Cells to mid log/ need ~ 5OD.Spin down and wash w/ 1ml H2O 2.Transfer to 1.5ml round bottom screw cap tube 3.add 200μl SDS sample buffer+ (5% BME,50mM NaF,1mM PMSF)-add to stock just before use; + 200μl glass
Co-staining with Thioflavin S & Carboxyfluorescein
Co-staining with Thioflavin S & Carboxyfluorescein 1.) Prepare 0.01% thioflavin S (T1892 , Sigma) solution in F12+ [0.01g / 100 ml F12+] 2.) Filter the staining solution with a 0.22 µm Millipore filter
Kamps's Western Blotting Protocol
activity).We use 12-14 microCi (approx.10 microliters)125I-protein A in a volume of 30-35 ml blocking buffer.We reuse this solution 3 times without noticing a reduction in signal (see #6 in Comments). 9)Wash again as in step 7. Damp dry on Whatman 3MM
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