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FuniCut™ AgeI

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  • ¥165
  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 15056ES25
  • 上海
  • 2026年02月09日
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    • 英文名

      FuniCut™ AgeI

    • 保质期

      二年

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 保存条件

      -20度

    • 规格

      25T

    产品简介
     
    FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
     
    产品信息
     
    货号 15056ES25
    规格 25 T
    识别位置 5'-A↓CCGGT-3'
    3'-TGGCC↑A-5'
    推荐反应条件 1×FuniCut™ 缓冲液;37°C孵育
    酶活 20 U/μL
    失活条件 80°C孵育20 min
    同裂酶 AsiGI, CspAI, BshTI, PinAI
     
    组分信息
     
    组分编号 组分名称 15056ES25
    15056-A FuniCut™ AgeI 25 μL
    15056-B 10×FuniCut™ Buffer 1 mL
    15056-C 10×FuniCut™ Color Buffer* 1 mL
    *10×FuniCut™ Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut™ Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
     
    储存条件
     
    -25~-15℃保存,有效期2年。
     
    注意事项
     
    1. 3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。
    2. 受CpG甲基化影响,剪切可能受阻。
    3. 本产品仅作科研用途
    4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
     
    使用方法
     
    1. DNA快速酶切流程
    1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作)
    组分 质粒DNA PCR产物 基因组DNA
    ddH2O 15 μL 16 μL 30 μL
    10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer 2 μL 3 μL* 5 μL
    底物DNA 2 μL (~1 μg) 10 μL (~0.2 μg) 10 μL (5 μg)
    FuniCut™ AgeI 1 μL 1 μL 5 μL
    Total 20 μL 30 μL 50 μL
    *本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×FuniCutTM  Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验,酶切前需纯化PCR产物。
    2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
    3) 37°C孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR产物),或30~60 min(基因组DNA)。
    4) 80°C温育20 min 即可使酶失活,停止反应(可选)。
    5) 如果使用FuniCut™ Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可直接上样电泳。
    2. 双酶切或多酶切
    1) 每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。
    2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。
    3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。
    3. 质粒的扩大反应体系
    组分 体积(20 μL) 体积(20 μL) 体积(50 μL)*
    DNA 1 μg 2 μg 5 μg
    10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer 2 μL 2 μL 5 μL
    FuniCut™ AgeI 1 μL 2 μL 5 μL
    Total 20 μL 20 μL 50 μL
    *如果总反应体系大于20 μL,可使用水浴、金属浴或沙浴,并增加孵育时间。
    4. 不同DNA中的识别位点数
    λDNA ΦX174 pBR322 pUC57 pUC18/19 SV40 M13mp18/19 Adeno2
    13 0 0 0 0 0 0 5
    5. 甲基化修饰影响
    Dam Dcm CpG EcoKI EcoBI
    无影响 无影响 剪切受阻 无影响 无影响
    6. 不同反应缓冲液中的活性*
    反应缓冲液 FuniCut™ Buffer Thermo Scientific
    FastDigest Buffer
    NEB
    CutSmart® Buffer
    Takara
    QuickCut™ Buffer
    活性 100% 50% 100% 50%
    *活性数据来自翌圣生物限制酶标准反应体系下的检测。
    Ver.CN20230531
     

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