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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
FuniCut™ AgeI
- 保质期:
二年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
25T
FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
产品信息
| 货号 | 15056ES25 |
| 规格 | 25 T |
| 识别位置 | 5'-A↓CCGGT-3' 3'-TGGCC↑A-5' |
| 推荐反应条件 | 1×FuniCut™ 缓冲液;37°C孵育 |
| 酶活 | 20 U/μL |
| 失活条件 | 80°C孵育20 min |
| 同裂酶 | AsiGI, CspAI, BshTI, PinAI |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 15056ES25 |
| 15056-A | FuniCut™ AgeI | 25 μL |
| 15056-B | 10×FuniCut™ Buffer | 1 mL |
| 15056-C | 10×FuniCut™ Color Buffer* | 1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
注意事项
1. 3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。
2. 受CpG甲基化影响,剪切可能受阻。
3. 本产品仅作科研用途。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
使用方法
1. DNA快速酶切流程
1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作)
| 组分 | 质粒DNA | PCR产物 | 基因组DNA |
| ddH2O | 15 μL | 16 μL | 30 μL |
| 10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer | 2 μL | 3 μL* | 5 μL |
| 底物DNA | 2 μL (~1 μg) | 10 μL (~0.2 μg) | 10 μL (5 μg) |
| FuniCut™ AgeI | 1 μL | 1 μL | 5 μL |
| Total | 20 μL | 30 μL | 50 μL |
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 37°C孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR产物),或30~60 min(基因组DNA)。
4) 80°C温育20 min 即可使酶失活,停止反应(可选)。
5) 如果使用FuniCut™ Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可直接上样电泳。
2. 双酶切或多酶切
1) 每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。
2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。
3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。
3. 质粒的扩大反应体系
| 组分 | 体积(20 μL) | 体积(20 μL) | 体积(50 μL)* |
| DNA | 1 μg | 2 μg | 5 μg |
| 10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer | 2 μL | 2 μL | 5 μL |
| FuniCut™ AgeI | 1 μL | 2 μL | 5 μL |
| Total | 20 μL | 20 μL | 50 μL |
4. 不同DNA中的识别位点数
| λDNA | ΦX174 | pBR322 | pUC57 | pUC18/19 | SV40 | M13mp18/19 | Adeno2 |
| 13 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 5 |
| Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
| 无影响 | 无影响 | 剪切受阻 | 无影响 | 无影响 |
| 反应缓冲液 | FuniCut™ Buffer | Thermo Scientific FastDigest Buffer |
NEB CutSmart® Buffer |
Takara QuickCut™ Buffer |
| 活性 | 100% | 50% | 100% | 50% |
Ver.CN20230531
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