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- 上海
- YLK-033SH
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
L-cysteine sulfoxide lyase, CSL
- 库存：
80
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- CAS号：
/
- 规格：
50管/24样
分光光度法50T/24S
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
半胱氨酰亚砜裂解酶（CSL）广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱)，十字花科芸薹属
(如卷心菜，菜花，西兰花)，以及豆科中的合金欢属中，并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨酸亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精，以及产生 C3H4O3、乙醛、甲醛和NH3。CSL是内源性甲醛生成的关键酶之一，测定CSL活性对于研究食品安全具有重要意义。
测定原理
CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生 C3H4O3，与 2,4-Dinitrophenylhydrazine 反应，在碱性条件下显棕红色，在510nm下有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存，临用前加入2mL水溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存，临用前加入10mL水溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存；
试剂三：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂五：液体30mL×1瓶，4℃保存。
半胱氨酰亚砜裂解酶（L-cysteine sulfoxide lyase, CSL）试剂盒相关图片展示：
样本处理
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，4℃浸提40min。12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定操作
| 对照管 | 测定管 | |
| 样品（μL） | 100 | 100 |
| 试剂一（μL） | 50 | |
| 蒸馏水（μL） | 50 | |
| 试剂二（μL） | 50 | 50 |
| 充分混匀，37℃反应20min | ||
| 试剂三（μL） | 200 | 200 |
| 试剂四（μL） | 100 | 100 |
| 充分混匀，室温反应5min | ||
| 试剂五（μL） | 500 | 500 |
| 充分混匀，静置5min，于1mL玻璃比色皿测定510nm处吸光值，记为A对照和A测定，△A=A测定-A对照。每个测定管设一个对照管。 | ||
计算公式
标准曲线：y = 1.4626x + 0.0027，R2 = 0.9993；x为标准品浓度：μmol/mL；y为吸光度△A
- 按蛋白含量计算
=0.034×（△A-0.0027）÷ Cpr
2. 按照样本质量计算
C-S lyase活性（μmol/min/g 鲜重）=（△A -0.0027）÷ 1.4626×V样÷(V样÷V样总×W )÷T
=0.034×（△A-0.0027）÷ W
V样，加入样本上清体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T，反应时间，20min。
注意事项
若测定结果中吸光值超过2，请将样本稀释后进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。香菇类样本活性较大，可能需要稀释80-100倍。
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文献和实验【信息】Northstar BioProducts（NSBP）
录酶（AMV-RT）类肝素酶联免疫试剂盒（ELISA kits for Heparan Sulfate）硫酸角质素（Keratan Sulfate）等方面处于世界领先地位，并且在世界各地有很多代理机构。 以下是主要象征性产品： 编 号 介 绍 酶（enzymes） 100330-1A Chondroitinase ABC, (Proteus vulgaris), EC 4.2.2.4 100461-1 Endoglycosidase F1, (Chryseobacterium
. Additive References DMSO (dimethyl sulfoxide) Amplifications 5 : 16 Gene 140
mol/L 硼酸和 1 mmol/L EDTA。 ( 7 ) 溴化乙锭（EB) 溶液：5 mg/ml EB 水溶液。 ( 8 ) 1% 的琼脂糖凝胶：1% ( m/V ) 的琼脂糖溶解在 0.5 X TBE 缓冲液中。加热至琼脂糖完全溶解。倒胶前加入 TB ( 1 : 10000 稀释)。在 0.5X TBE 缓冲液中电泳。 ( 9 ) 胶回收试剂盒（GE 或 Qiagen 公司）。 ( 10 ) PCR 回收试剂盒（GE 或 Qiagen 公司）。 2.3 酶解反应
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