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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
100
- 英文名:
/
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
100管/96样
微量法100T/96S
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。
测定原理:
亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。
自备仪器和用品:
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰-醋酸、氯仿和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入15 mL蒸馏水充分溶解。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入469μL冰-醋酸,加入15 mL蒸馏水充分溶解。
标准液:液体1mL×1支(EP管),100 μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。
测定:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管:取EP管,依次加入125 μL蒸馏水,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入125 μL标准液,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入125 μL血清,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式:
血清铁含量(μmol /dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总
=10 × (A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:100 μmol/L Fe3+标准液;V总:标准液总体积1mL;1 dL=0.1 L。
注意事项:
1、血清铁含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。
3. 最低检出限为1μmol/L。
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文献和实验妊娠及口服避孕药或雌激素注射可使血浆TRF升高。 有免疫试剂盒供应抗体级标准品。用免疫扩散或浊度法检测。正常成人参考值为2200-4000mg/L.新生儿为1300-2750mg/L.临床评价时常同时测定血清铁含量及TRF的铁结合容量(TIBC),并可计算出的TRF铁饱和度(%)。TRF亦可通过测定而间接计算估得,其计算方程式如下:TRF(mg/L)=TIBC(μg/L)×0.70
转铁蛋白(transferrin,TRF,siderophilin)
,因此可以作为营养状态的一项指标。 妊娠及口服避孕药或雌激素注射可使血浆TRF升高。 有免疫试剂盒供应抗体级标准品。用免疫扩散或浊度法检测。正常成人参考值为2200-4000mg/L。新生儿为1300-2750mg/L。临床评价时常同时测定血清铁含量及TRF的铁结合容量(TIBC),并可计算出的TRF铁饱和度(%)。TRF亦可通过测定而间接计算估得,其计算方程式如下: TRF(mg/L)=TIBC(μg/L)×0.70
,如再阴性,可认为阴性,弃之。一般流感监测中,每份标本可只接种2-3个鸡胚,当羊水和尿囊液中查不到HA活性,可认为阴性标本,不必进行盲传。 三、病毒鉴定 至今对流感病毒鉴定最常用的方法为红细胞凝集抑制(HI)测定,因该法简便、易行、结果可信。HI试验分常量法和微量法两种。微量HI法是目前国际普遍使用的方法,也是WHO流感监测中推荐使用的标准方法。HI试验的原理是流感病毒表面具有的血凝素蛋白能和含有唾液酸的受体物质特异结合,红血球浆膜上含有这类物质,当一定量病毒和适当比例的红血球混合后发生凝集,此为










