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3个月
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上海烜雅生物科技有限公司
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详见说明书
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100管/96样
植物花色苷含量试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素,属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中,使其呈现由红到紫等不同颜色,是植物主要的呈色物质。测定原理:
采用 pH 示差法测定花色苷含量,当 pH 为 1.0 时花色苷在 530nm 处有最大吸收峰,而当 pH 为4.5 时,花色苷转变为无色查尔酮形式,在 530 处无吸收峰, 利用此特性分别测定在不同 pH 下的 530nm 和 700nm 处的吸光度值。pH 示差法减少了溶液 pH 和溶剂差异的影响,排除了其他非花色苷类物质对检测结果的干扰。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、超声波清洗器、研钵和蒸馏水。试剂的组成和配制:
提取液:液体 100 mL× 1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 20 mL× 1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 20 mL × 1 瓶,4℃保存;
花色苷的提取:
按照样品质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 样品,加入 1mL提取液),充分匀浆后转移到 EP 管中,提取液定容至 1 mL,盖紧后超声波提取 2 h,8000 g,常温离心 10 min,取上清液待测。测定步骤:
1、酶标仪预热 30min 以上;试剂一和试剂二 25℃(室温)预热 10min 以上;2、取 20 µL 上清液和 180 µL 试剂一(相当于稀释 10 倍),40℃水浴 20min,分别测定 530nm
和 700nm 处的吸光值,分别记为 A1 和A2。
3、 取 20 µL 上清液和 180 µL 试剂二(相当于稀释 10 倍),40℃水浴 20min,分别测定 530nm
和 700nm 处的吸光值,分别记为 A3 和A4。
4、 计算△A=(A1-A2)-(A3-A4)
注意:如果A1大于1,可以适当加大稀释倍数,保证总体积200 µL不变,如10 µL上清液和190
µL试剂一(相当于稀释20倍);如果A1小于0.1,可以适当缩小稀释倍数,保证总体积不变,如100 µL上清液和100 µL试剂一(相当于稀释2倍),使A1保持在0.1~1范围内,可提高检测灵敏度;同样调整上清液和试剂二体积比例;计算时以实际稀释倍数代入下述公式中。
花色苷含量计算:
花色苷含量(µg/g 鲜重)=[ΔA×V÷(ε×d)×M×F×106]÷W=33.4×ΔA× F÷W
V:提取液体积,1×10-3L;ε:花色苷的摩尔消光系数,2.69×104 L / mol /cm;d:96 孔板光径,0.5cm;M:花色苷的相对分子质量:449.2g/mol;F:稀释倍数;106:1g=106µg;W: 样本干重:g。
ΔA 线性范围为 0.005-0.5。
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文献和实验各种糖(葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖等)以单糖或寡糖的形式与花色素的 3位或 5位的羟基中的一个或者两个结合的色素苷。现从三类花色素中举其具有代表性的例子:花葵苷( pelargo-nin)含于天竺葵的朱红花或矢车菊的红花中,此外,草莓苷( fragarin)含于草莓的果实里。花色素的糖苷——花色苷( cy-anin,花色素 -3, 5-二葡糖苷)是矢车菊的蓝色花的主要色素,紫苑苷可在纹冬菊或翠菊花、黑豆皮、桑的果实、已红叶的枫类( Acer circumlobatum
药用,如鸭跖草属的鸭跖草(参见彩图插页第125页)、饭包草等。鸭跖草全草入药,含有飞燕草苷(delphinin,为飞燕草素-3,5-二葡萄糖苷)、粘液质等。花瓣含花色苷类:飞燕草苷、阿伏巴苷(awoba-nin)及鸭跖草素(commelinin)。功能清热解毒,凉血,利尿。此外,杜若属、水竹叶属、蓝耳草属、吊竹梅属、紫万年青属的一些种类也供药用。观赏植物有紫竹梅、吊竹梅、紫万年青、紫露草、白花紫露草等,常栽培于庭园或温室。 鸭跖草科的系统发育位置,有的学者认为与雨久花科有紧密的关系
,兼有陆生和附生,相当多的种类分布树线以上,形成高山植被,少数种类在低海拔地区,有些生于近海地方或附生于红树林。由于本科中许多植物的喜阳生态和对贫瘠、酸性或缺乏土壤条件下的适应能力,常成为先锋植物或构成向阳地方、火烧迹地的次生植被。 本科的化学成分可分为 4类:①多酚类化合物和丹宁,普遍存在的是白花色苷( leucoanthocyanin)、黄酮醇( flavonol)、儿茶酸( catechin)、没食子鞣质( gallotannis)、逆没食子鞣质( ellagitannin)、缩合










