- ￥400
- xybio
- XY-sh0124
- 上海
- 2026年01月06日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
80
- 英文名：
/
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
50管/24样
注 意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
PPO（EC1.10.3.1）主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化产生醌，从而引起褐化，与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。
测定原理：
PPO能够催化邻苯二酚产生醌，后者在525nm有特征光吸收。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体，60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体，40mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体，10mL×1瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）或果汁样本的处理：
按照血清（浆）或果汁体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.1mL血清（浆）或果汁加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
- 分光光度计预热30min以上，调节波长至525nm，蒸馏水调零。
- 样本测定（在EP管中依次加入下列试剂）
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 180 | |
| 煮沸的样本 | 180 | |
| 试剂一 | 720 | 720 |
| 试剂二 | 180 | |
| 蒸馏水 | 180 |
充分混匀，10000g，25℃离心10min，取上清，525nm处检测测定管和对照管吸光度。ΔA=A测定管-A对照管。
注意：煮沸样本的操作：取300μL离心上清于EP管中，进行5min 95℃水浴处理；每个测定管需要设一个对照管，可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液，然后集中进行5min 95℃水浴处理。
PPO活性计算：
1、血清（浆）或果汁PPO活性
单位的定义：每分钟每mL血清（浆）或果汁在每mL反应体系中使525nm处吸光值变化
0.01为一个酶活力单位。
PPO（U/mL）=ΔA×V反总÷(V液× V样÷V样总)÷0.01÷T =60×ΔA÷V液
2、组织、细菌或细胞PPO活性
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每分钟每mg组织蛋白在每mL反应体系中使525nm处吸光值变化0.01为一个
酶活力单位。
PPO（U/mg prot）=ΔA×V反总÷（V样×Cpr）÷0.01÷T =60×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
（2）按样本鲜重计算：
单位定义：每分钟每g组织在每mL反应体系中使525nm处吸光值变化0.01为一个
酶活力单位。
PPO（U/g 鲜重）=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.01÷T =60×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位定义：每分钟每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中使525nm处吸光值变化0.01为一个酶活力单位。
PPO（U/104 cell）=ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.01÷T =0.12×ΔA
V反总：反应体系总体积，1.08mL；V液：加入血清（浆）或果汁体积，0.1mL；V样：加入样本体积，0.18mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，10 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500万。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验一、原理与方法 PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物，在0.2M磷酸氢二钠－0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中，PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌，在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化，通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。 其方法是：在含有4mlPH5.8的0.2M磷酸氢二钠－0.1M柠檬酸缓冲液试管中加入0.05ml0.05M邻苯二酚溶液，在30℃恒温水浴中预热后加入0.05ml酶液，反应5分钟，在分光光度计410nm处读取吸光
相关专题 一、原理与方法 PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物，在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中，PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌，在分光光度计 410nm处使反应体系的OD值产生变化，通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。 其方法是：在含有4mlPH5.8的0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液试管中加入0.05ml0.05M邻苯二酚溶液
-巯基乙醇，因为螯合剂PPVP分子中的CO-N=基能与多酚类物质（如原花色素类物质）芳香环上的羟 基结合形成稳定的复合物，使多酚类不能成为PPO的底物而被氧化，并且在以后的抽提步骤中被除去。同时β-巯基乙醇分子中的巯基能打断PPO的二硫键使之 失活，从而防止了多酚类物质的氧化。因此，所提的RNA样品呈乳白色或白色，说明RNA样品中多酚类物质得到了有效的去除。 改良Trizol法2采用在匀浆液中加入终浓度为20%的乙醇沉淀多糖、在裂解液抽提的上相中加入终浓度为3mol
