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总花青素（总花色苷）含量试剂盒,微板法

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  • ￥790
  • wksubio
  • WS6210W
  • 国内
  • 2025年12月31日
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    • 英文名：

      Total anthocyanin (total anthocyanin) content test kit

    • CAS号：

      WS6210W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      96T

    本试剂盒仅供科研使用
    总花青素（总花色苷）含量试剂盒说明书
    （货号：WS6210W 微板法 96 样 )
    一、产品简介：
    花青素是一种广泛存在于自然界植物中的水溶性天然色素，但是在自然状态下常与各种单糖形成糖苷形
    式存在，即花色苷。它是植物细胞中可见的植物水溶性色素，存在于几乎所有的陆地植物的根、茎、叶、
    花及果实中；且还具有较强的抗氧化活性，能够清除自由基。
    本试剂盒采用 PH 示差法，花色苷的颜色随 PH 值的改变而发生变化，而干扰物质的特征光谱不随 PH
    的改变而变化。pH 为 1 时，花色苷以红色的 2-苯基苯并吡喃的形式存在。pH 为 4.5 时，花色苷以无色的
    甲醇假碱形式存在，通过确定两个对花色苷吸光度差别最大，但是对花色苷稳定的 pH 值(一般选 pH 值为
    1.0 和 4.5，在最大吸收波长为 700 nm 处，花色苷溶液的吸光度差值与花色苷的含量成比例，进而计算得
    出花色苷总量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格试剂名称
    保存要求
    提取液
    液体 110mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    液体 30mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    液体 30mL×1 瓶
    4℃保存
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、水浴锅、可调式移液器、研钵和蒸馏水。
    四、总花青素含量的测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备
    ① 组织样本：
    称约 0.05g 样品(水分充足的样本，可取样 0.5g)，加入 1mL 提取液，75℃震荡提取
    25min，若提取过程中提取液有损失，最后可用提取液定容至 1mL 后，室温 12000rpm，
    离心 10 min，上清液待测。
    【注】：若是固体干样本，先磨碎并过 40 目筛后，取 0.02g 的过筛后干样，加入 1 mL 提取液，其他
    步骤同上。最后离心得到的上清液待测。
    ② 液体样本：
    澄清的液体的样本直接测定，若浑浊则离心后取上清液检测。
    2、上机检测
    ① 酶标仪预热 30min 以上，对于含量较高的样本，可先选取 2 个样本做预测定，找出
    适合本次检测样本的稀释倍数 D（用蒸馏水进行稀释即可）。
    ② 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（µL）
    测定管
    对照管
    上清液
    100
    100
    试剂一
    300
    试剂二
    300
    室温避光平衡 60min，分别取 200µL 澄清液体（若浑浊可
    12000rpm 室温离心 5min）至 96 孔板中，于 530nm 和 700nm
    处读值。测定管记作 A 测定=A530-A700；对照管记作 A 对照
    =A530-A700；△A=A 测定－A 对照(每个样本需做一个自身对照)。本试剂盒仅供科研使用
    2
    【注】：1.若A测定管于530nm处的值大于1.5，则上清液可用提取液进行稀释，稀释后的上清液
    再按照上述加样表操作。稀释倍数D需代入计算公式计算。
    2.若△A值小于0.01，可增加样本取样质量W,则改变后的W需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、 按照样本质量计算：
    总花青素含量(mg/g)=(ΔA÷(ε×d)×V2×103×Mr)÷(W×V1÷V)×D
    =0.1336×ΔA÷W×D
    2、 按照样本浓度计算：
    总花青素浓度(mg/mL)=(ΔA÷(ε×d)×V2×103×Mr)÷V1×D
    =0.1336×ΔA×D
    ε---为矢车菊-3-葡萄糖苷消光系数，26900 L/mol/cm；
    Mr---为矢车菊素-3-葡萄糖苷分子量，449.2；
    d---光程，0.5 cm；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1；
    V---样本提取液，1mL；
    W---样本重量，g；
    V1---检测操作表里上清液加样体积，100µL=0.1mL；
    V2---检测总体积，400µL=4×10-4L；

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