- ￥699 - 1999
- KA&M-BIO
- 上海
- MZ19200
- 2025年11月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 英文名：
pCMV3-Spike-FLAG
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 规格：
管
pCMV3-Spike-FLAG质粒可提供干粉质粒、菌液。使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCMV3-Spike-FLAG质粒圻明公司现货供应，可按客户需求单独构建载体，
一、载体构建：
(1)目的DNA片段和载体的制备；
(2)目的DNA片段和载体的连接；
(3)连接产物的转化；
(4)克隆筛选。
(5)测序验证及目标质粒交付
二、详细内容
1、以PCR扩增为基础的各类载体构建，如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体；报告基因载体等；
2、基因定点突变，包括单点突变，多点突变，基因缺失等；
3、载体元件替换和改造；
4、siRNA载体和miRNA表达载体构建；
5、过表达载体构建。
详询客服。公司整合了国外数个基因库资源，具有以下优势：
种属齐全：人、小鼠、大鼠、其它种属；
数量众多：多达几万数量cDNA克隆（cDNA模板质粒）和ORF克隆（ORF表达质粒）；
质量优异：保证目的基因序列正确，无氨基酸突变，每个克隆质粒均可提供相应的测序报告；
价格实惠：与您亲自调取基因相比，我们的服务让您更加省时、省力、省心；
pCR-XL-TOPO-ZNF236(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-HTR3D(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-XL-TOPO-ACIN1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-XL-TOPO-BZRAP1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-FAM38A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-POC5(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ZNF404(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-TRIM60(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-NT5C1A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-RGL4(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ANKRD23(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-PLEKHN1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-XL-TOPO-SLIT1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ETV1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ANKDD1A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR4-TOPO-AFF3(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Amp
pCR4-TOPO-ZNF709(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Amp
pCR4-TOPO-OR2W5(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Amp
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文献和实验liuruya 问别人要了个带GFP-tag（GFP-N2载体）的质粒，目的基因1.4kb，分子量约52kD，转染293T细胞能见荧光，WB杂不出来，设置了阴性和阳性对照证实不是WB的技术问题。后来又换了个flag-tag，仍然杂不出来WB。仔细检查过序列，不存在移码的问题，非常费解。有同学分析是空间位阻问题，不知换个tag是不是能解决这个问题。有同学遇到过这种问题么，或者帮忙分析一下可能的原因。谢谢！！！ zhuqueleee
【求助】克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费？
个和12,000个，其中11,000个克隆的表达已经通过Western Blot的验证。这些克隆以2种形式提供：一种是在表达的蛋白C末端带Myc-DDK(即FLAG)标签，一种是带GFP标签。这些cDNA克隆均构建于pCMV6入门载体上，可方便转换至其他目的载体。 按照其网页上的促销价：900RMB/clone × 100 ＝ 9万RMB， 直接买，不用等时间，就可搞定，批量买估计还可以讲价，关键的是品质有保证。 注：非公司托儿，因前段时间帮朋友筹划项目专门研究
质粒转染细胞的效率受到多种因素的影响，如细胞的类型，细胞的状态，转染时细胞的密度，转染的方式（电转或化转），DNA 的质量、转染试剂的选择等。从质粒角度来看，超螺旋比例高，且内毒素残留低的质粒会更有利于提高细胞转染的效率。 pCMVβ DNA 用不同试剂盒提取，转染 Huh-7 细胞，转染效率对比 5. 质粒酶切有问题，切不开或者酶切有杂带 酶切切不开可能跟酶本身状态、酶切缓冲液、酶切温度以及质粒本身都有关系。从酶切条件考虑，在确保酶活性的前提下，选择合适的酶切缓冲液、温度
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