B6-Rpe65 R44X小鼠

产品编号：C001360

品系背景：C57BL/6J

繁殖：纯合×纯合
 

品系描述

先天性黑蒙（Leber’s congenital amaurosis, LCA）是一类遗传性视网膜疾病，具有严重的视觉损伤。主要特征是新生儿或出生后数月视力下降，眼球震颤，视杆和视锥细胞的光反射下降或缺损。Rpe65是一种异构水解酶，主要存在于视网膜色素上皮细胞（Retinal pigment epithelium, Rpe）中，其主要作用是催化全反视黄酯转变为11-顺视黄醇。Rpe65基因突变不仅会扰乱视循环过程，还会进一步引起神经视网膜和rpe细胞的退化，造成不可逆的盲性疾病。目前已发现Rpe65等位基因的突变会破坏视细胞并导致Leber先天性黑蒙2型（LCA2）和早发性视网膜营养不良的临床表现，最终导致完全失明。该品系纯合小鼠是可存活且可育的。

 

构建方式

Rpe65基因共有15个外显子，通过基因编辑技术在Rpe65基因上进行p.R44*(CGA to TGA)点突变，导致提前终止。

 

研究应用

该品系是Leber先天性黑蒙2型的模型，可用于研究视觉周期。

 

模型验证

• 视网膜光学相干断层扫描（OCT）

图1. 4周龄B6-Rpe65 R44X和C57BL/6J野生型小鼠的光学相干断层扫描（OCT）结果。与野生型小鼠相比，B6-Rpe65 R44X小鼠具有明显的视网膜病变表型。

• 眼部HE染色和免疫荧光染色

图2. 6周龄B6-Rpe65 R44X和C57BL/6J野生型小鼠的眼部组织HE染色和免疫荧光染色结果。与野生型小鼠相比，B6-Rpe65 R44X小鼠由于携带致病性突变，Rpe65蛋白的表达明显缺失。

• 视网膜电图（ERG）检查

图3. B6-Rpe65 R44X小鼠（REP65）和C57BL/6J野生型小鼠（WT）的视网膜电图（ERG）结果。与野生型小鼠相比，B6-Rpe65 R44X小鼠Scotopic和Photopic ERG a波和b波均熄灭，表明该小鼠眼部光感受细胞的缺失。

以上结果表明RPE细胞功能被破坏，光感受器细胞凋亡，视杆细胞外节膜盘排列紊乱，视杆细胞外节膜盘排列紊乱，视杆细胞波形熄灭，符合先天性黑蒙典型临床表现。