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        细胞的传代次数和间隔时间

        互联网

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        问:复苏的肿瘤细胞传代多久后,弃之不用并解冻新的细胞?在传代的过程中, 有时细胞长得太满, 都开始死亡了才传,对细胞有什么不良的影响,有没有固定的传代间隔时间?

        答:rumex认为培养的代数因细胞不同而不同,肿瘤细胞培养两个月应该不会有问题,但培养的不好就另说了,细胞数量达饱和密度后,细胞遂停止增殖,进入停滞期。停滞期细胞虽不增殖,但仍有代谢活动,继而培养液中营养渐趋耗尽,代谢产物积累、pH降低。要及时做分离培养即传代,否则细胞会中毒,发生形态改变,重则从底物脱落死亡,故传代应越早越好。传代过晚(已有中毒迹象)能影响下一代细胞的机能状态。在这种情况下,虽进行了传代,因细胞已受损,需要恢复,至少还要再传1~2两代,通过换液淘汰掉死细胞和使受损轻微的细胞得以恢复后,才能再用。否则影响实验结果,而且我们连续两次培养太密的细胞就不要了。传代时间要你自己掌握哦,因为不同细胞的倍增时间可能不同,你接种的密度也可能不同,所以什么时候传代你也可以自己估计啊,开始培养细胞时,每天计数,估计倍增时间,计算以你接种的密度多久到对数生长期,一般保持在对数期内传代,一周两次差不多了。

        liuzeyi2002认为要根据细胞的代谢情况和接种密度,把握传代间隔时间。我们养的是肺癌细胞,A549就代谢很快,如果是1比5稀释传代的,也要3天就传一次代,还有的细胞因为恶性度较高,贴壁不好,需要两天传一次。

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