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细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | NTHY ORI 3-1人甲状腺正常细胞 |
| 细胞别称 | Nthyori3.1;Nthy-ori3.1;NTHY-ORI3.1;HTori-3.1 |
| 细胞货号 | SNL-213 |
| 来源 | 甲状腺;SV40转化;女性;35岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 收录 | ECACC |
| 生物安全等级 | 2 |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S(货号:SNLM-213) |
| 培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
| 细胞简介 | NTHY ORI 3-1细胞是用含有起源缺陷SV40基因组(SV-ori)的质粒转染永生化正常人原发性甲状腺滤泡上皮细胞而获得的。SV40 DNA能够使正常甲状腺上皮细胞永生,并保留几种不同的功能。 |
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文献和实验分子.复制子(replicon)复制子:基因组中能单独进行复制的单位.每个起始点到终止点的区域为一个复制子.起始点(origin of replication ,ori):原核生物DNA分子中只有一个,长度 200bp左右.大肠杆菌ori C有245 bp.真核生物有多个复制起始点.终点(ter):D,A,C,B(23bp共有序列)Tus(terminator utilization substance)识别终止序列.复制的方向:单向或双向原核生物DNA聚合酶(DNA polymerase,DNA
贴壁细胞和悬浮细胞之间的差异显著。相对于贴壁细胞(如HEK,CHO),悬浮细胞(如HL 60,Jurkat)非常难以转染,可能是因为细胞间膜结构的差异,但目前还没有分子水平上合理机制的解释。 3) 分板方案——在对培养细胞进行分板传代培养之前,必须把贴壁细胞用胰蛋白酶消化使之脱离培养基质。这个常规操作可导致正常细胞功能受到严重损害。因此分批方案的不同(如,胰蛋白酶消化时间的长短,胰蛋白酶的灭活等)需要优化。 4) 传代次数——传代次数是指对一个细胞系进行分批传代
酶消化使之脱离培养基质。这个常规操作可导致正常细胞功能受到严重损害。因此分批方案的不同(如,胰蛋白酶消化时间的长短,胰蛋白酶的灭活等)需要优化。 传代次数——传代次数是指对一个细胞系进行分批传代的频度(通常在一个实验室范围内)。某些细胞系相比较其他细胞系而言较不稳定,可能会随着培养时间的延长而改变,视不同的细胞系和培养条件而定。因此名称相同的同一细胞系在生理学和形态学(以及转染 能力)性质也可能会有很大的差异。一般而言,细胞在冻存复苏后的一两代之内或直到它们完全复苏之前都很难转染。
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