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- 尚恩生物(SUNNCELL)
- SNL-146
- 2026年01月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | PA317[暂不提供]逆转录病毒包被的NIH3T3细胞 |
| 细胞别称 | pA317 |
| 细胞货号 | SNL-146 |
| 来源 | 胚胎；成纤维细胞；NIH Swiss；雄性 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S（货号：SNLM-146) |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | PA317细胞源自TK-NIH/3T3细胞，通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。通过感染或转染将逆转录病毒载体导入PA317细胞，会生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒，PA317细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。但是可能因为用于构建PA317细胞而转入的DNA丢失，能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少，在含0.03mM次黄嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培养基中短暂(大约5天)培养可以选出保留了包装功能的细胞。选择后，PA317细胞应在HT培养基(0.03mM次黄嘌呤、0.02mM胸苷)中培养4天，以稀释残留的氨甲喋呤，此后PA317细胞不需选择可以稳定至少1个月。PA317可以用于3D细胞培养，也是一种合适的转染宿主。 |
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文献和实验逆转录病毒载体属RNA病毒，但可在受染细胞内反转录产生DNA互补链，此DNA单链可作为模板合成第二条DNA链，第二条DNA链可掺入细胞基因组DNA中。此病毒可利用宿主细胞的酶自行转录与复制，RNA可合成蛋白，再包装病毒，RNA从胞内释放，成为感染性病毒，该载体可经不同方式改变。介导过程可使病毒单拷贝基因组稳定地进入细胞。首先，逆转录病毒的繁殖必须要有适当的包装细胞系，以利于产生高滴度的病毒，同时还具有适当的结构。如：ψ2(第一代包装细胞)，PA317(第二代包装细胞)，ψ1-CRIP
7.淋巴瘤2株：LY-S, T2 8.乳腺癌1株：SK-Br-3 9.脑胶质母细胞瘤1株：BT325 10.胎盘绒毛膜上皮样癌1株：JAR 11.黑色素瘤1株：A375 12.人纤维肉瘤1株：HP 13.骨髓瘤细胞1株：SP2/0 14.病毒包装细胞2株：PA317, NIH3T3 15.其他：L929
tydyhan：我一直做细菌这块，对病毒操作不是很懂，请教大家：建立表达某基因的重组逆转录病毒载体的B16细胞系含某基因的重组逆转录病毒载体已获得，需转染PA 317包装细胞，通过G418筛选获得表达某基因的重组逆转录病毒。Polybrene进行转染B16细胞，筛选阳性转化克隆，获得稳定表达的B16细胞株。这里怎么具体进行操作??丁香园网友adychen认为：１、首先最好选择的是带ＥＧＦＰ逆转录病毒载体，方便以后的转染率和感染率的观察．２、重组载体；３、得出载体抗性基因的抗生素最佳细胞筛浓度
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