靶标代谢流分析

基于13^C或者15^N标记的靶标代谢流分析能够系统地定量细胞或者组织内特定代谢通路代谢网络的流量分布及各代谢途径的相对贡献，其优点是可以利用细胞内代谢物的质量同位体信息的分析方法，不但在很多情况下能够直观地表明代谢流量的整体走向，而且通过计算能够准确定量地揭示细胞内各个代谢反应的活性，以及深入理解平行反应、可逆反应等多种复杂的细胞内代谢过程，直观揭示细胞胞内的主要活性途径及各个途径的相对贡献及其分布变化特点，从而鉴定出相关疾病发生发展过程的早期诊断的标志物及其关键的主要代谢通路，并揭示其相互调控规律，为疾病发生的临床早期诊断、药物靶点治疗和预后判断提供强有力的科学依据。

靶标代谢流解决方案

BIOTREE能量代谢之靶标代谢流解决方案：主要集中在能量代谢明星通路精细化代谢速率研究，包含糖酵解途径、三羧酸循环、磷酸戊糖途径。

糖酵解途径(Embden-Meyerhof-Parnas pathway, EMP)是指糖原或葡萄糖分子分解至生成bingtong酸的阶段，是体内糖代谢最主要途径。此途径在动植物和许多微生物中普遍存在。在需氧生物中，糖酵解途径是葡萄糖氧化生成二氧化碳和水的前奏。糖酵解生成的bingtong酸可进入线粒体，通过三羧酸循环(Tricarboxylic acid cycle, TCA)及电子传递链彻底氧化成二氧化碳和水，并生成腺嘌呤核苷三磷酸。

三羧酸循环是(Tricarboxylic acid cycle, TCA) 需氧生物体内普遍存在的代谢途径，是生物机体获取能量的主要方式，是糖，脂肪和蛋白质三种主要有机物在体内彻底氧化的共同代谢途径，是体内三种主要有机物互变的中心枢纽。

磷酸戊糖途径(Pentose phosphate pathway, PPP) 是葡萄糖氧化分解的一种方式，在动物、植物和微生物中普遍存在。在生物体内磷酸戊糖途径(Pentose phosphate pathway, PPP)除了提供能量外，主要是为合成代谢提供多种原料。如为脂肪酸、胆固醇的生物合成提供还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate, NADPH)；为核苷酸辅酶、核苷酸的合成提供5-磷酸核糖；为芳香族氨基酸合成提供4-磷酸赤藓糖。

技术优势

技术成熟、灵敏度高

专业的数据分析团队，通过Matlab flux-8等软件进行原始数据处理，并进行PCA、柱状图、热力图、Bi-plot等分析

技术路线

技术参数

▶ 样本要求

植物组织： 1X10⁷ cells/sample

血清、血浆：200 μL/sample 

尿液：1 mL/sample 

组织：200 mg/sample 

粪便、肠道内容物：200 mg/sample

细胞 、微生物：1×10⁷ cells/sample

培养液：200 μL/sample 

因组织特异性，某些组织可能检测不到稳定同位素标记的信号。

▶ 生物学重复

样本数量: 植物和微生物n≥6，动物样本n≥10，临床样本n≥30，所有重复样本独立分析

其他种类的样品在收集之前请联系公司销售工程师

▶ 检测平台

GC-Q-MSE，Agilent/ TripleTOF 6600, Sciex/Q Exactive Focus, Thermo/Orbitrap Exploris 120, Thermo

▶ 常规项目周期

实验检测：25个自然日

数据分析：5个自然日

应用方向

• 通过比较不同环境条件及各种代谢性疾病的不同代谢途径的代谢流量的分布变化，揭示出相关疾病发生发展过程中的主要代谢通路及其早期诊断的标志物
• 通过13^C代谢流量技术对胞内外的中间代谢物的变化示踪，可以鉴定出基因工程菌的关键的代谢通路和活性，为提高目标代谢产物的合成提供直接的依据
• 可以比较分析细胞，组织及其血样和尿液在基因改造的前后的代谢功能变化