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人急性原粒细胞白血病细胞 KASUMI-1(STR鉴定正确)

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  • 赛泓瑞生物
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  • SHC1048H
  • 2025年07月12日
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      100

    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    种属

    别称

    KASUMI-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1

    组织来源

    外周血

    疾病

    成髓细胞;急性髓细胞白血病

    传代比例/细胞消化

    1:2传代,维持细胞浓度在3x105 - 3x106 /ml

    完全培养基配置

    RPMI1640培养基;20%胎牛血清;1%双抗

    简介

    该细胞系是从一名急性髓系白血病(AML)患者的外周血中建立的。这是一个8号21号染色体易位的白血病细胞系。这种易位将AML1与ETO(或MTG8)基因并列,产生融合基因AML1-ETO(也称为AML1-mtg或RUNX1-CBF2T1)。因此,细胞产生嵌合的AML1-ETO蛋白。该蛋白下调CEBPA mRNA、蛋白和DNA结合活性,这对粒细胞的分化至关重要。在增殖实验中,培养的细胞对白细胞介素-3 (IL-3)、白细胞介素-6、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞顶体噬菌体CSF (GM-CSF)有反应,但对IL-1和IL-5无反应。该细胞复苏后需要两周左右恢复正常生长。

    形态

    原粒细胞

    生长特征

    悬浮生长

    倍增时间

    ~48-72h

    STR

    Amelogenin: X;D5S818: 9,11;D13S317: 11,13;D7S820: 8,11;D16S539: 9,12;vWA: 14;THO1: 6,9;TPOX: 8,9;CSF1PO: 10,12

    培养条件

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    冻存条件

    冻存液:90%FBS,DMSO 10%,

    或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040

    保藏机构

    ATCC; CRL-2724 

    备注

    该细胞为悬浮细胞 ,请注意离心收集细胞悬液 ,请勿直接倒掉细胞培养液,a) 该细胞复苏后成活率较低,会出现大量死细胞和死细胞碎片,培养两周后有所好转。建议每1-2周对细胞进行1000rpm, 5mins离心,弃掉上清,加入新鲜完全培养液,可以去掉部分细胞碎片和颗粒。培养过程中会出现死细胞和细胞碎片,收到邮寄的活细胞的用户若发现培养物内有部分死细胞和细胞碎片,此为正常现象。b) 细胞培养过程中会有轻微聚团,轻轻吹打开即可。当细胞密度较大或者培养液变黄时,需要及时进行半换液或者完全换液。c) 该细胞对血清质量较为敏感,我库建议您使用进口大品牌优质血清进行培养。d) 请注意保持细胞密度在合适的范围(3x105 ~ 3x106 /ml),不能过稀。

    产品使用

    仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。


    细胞培养操作
    1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
    3. 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
    a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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