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- 详细信息
- 文献和实验
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- 提供商:
吉满生物
- 服务名称:
UTR报告基因质粒 ,启动子荧光素酶报告基因质粒,SNP等其他报告基因
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询价
吉满可提供UTR报告基因质粒 ,启动子荧光素酶报告基因质粒,SNP等其他报告基因
根据客户的实验需求及待研究的目的基因,将特定的片段构建到相应的报告基因载体上,用于基因表达调控作用,信号通路,SNP作用等相关研究。
报告基因(reporter gene)是一种编码可易于鉴定的蛋白质或酶的基因,其与目的基因融合后的表达产物可用来标定目的基因的表达调控,广泛应用于基因调控、RNA互作等研究领域。
作为报告基因,在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件:
(1)已被克隆或全序列已被测定;
(2)表达产物在受体细胞中不存在,在被转染细胞中无相似的内源性表达产物;
(3)其表达产物容易被检测到。
报告基因质粒是整合有报告基因的重组质粒。根据不同的研究方向需要构建的基因序列及使用载体不同。其构建方式主要参考待研究序列在基因上的位置。常用的启动子报告基因载体有pGL3-basic载体。载体含Luciferase荧光素酶报告基因,无启动子,用于研究目的启动子的功能,在Luciferase上游包含一个多克隆位点,用于插入启动子序列,若Luciferase荧光素酶活性上升,说明该段启动子受到转录因子的调控。
常用的3’UTR报告基因载体为PGL3-CMV-LUC-MCS。该载体包含一个CMV启动子控制下的luciferase报告基因。在luciferase的3'UTR区域包含一个多克隆位点,用于插入预测miRNA的结合靶序列或其他核苷酸序列。若荧光素酶活性下降,说明该段插入序列受到miRNA调节,这模仿了miRNA靶序列的作用方式。
服务流程

(1)吉满生物具有专业的技术研究团队和丰富的分子克隆经验;
(2)吉满生物目前已有多种报告基因载体可选,应用于各种报告基因研究系统;
(3)可根据客户需求构建不同的目的载体。
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文献和实验【1】Synthetic Retinoid Sulfarotene Selectively Inhibits Tumor-Repopulating Cells of Intrahepatic Cholangiocarcinoma via Disrupting Cytoskeleton by P-Selectin/PSGL1 N-Glycosylation Blockage,复旦大学中山医院,IF=14.2994,Advanced Science
【2】Transposable elements-mediated recruitment of KDM1A epigenetically silences HNF4A expression to promote hepatocellular carcinoma,上海交通大学医学院附属仁济医院,IF=14.2006,nature communications
【3】Macrophage exosomes mediate palmitic acid-induced metainflammation by transferring miR-3064-5p to target IκBα and activate NF-κB signaling,南方医科大学南方医院,IF=11.3997,Journal of Advanced Research
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品
zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题,未得其解,恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢 msniu
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