- ￥690
- YLKBIO
- YLK-T0046
- 国产
- 2025年12月18日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
306
- 英文名：
Liquid Sample RNAOUT
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
50次
中文名称：液体样品RNAout
英文名称：Liquid Sample RNAOUT
产品规格：50次
产品货期：现货
产品运输：常温运输
产品介绍：柱式法纯化各种液体样品（如脑脊液，淋巴液，唾液等）的总RNA
产品及特点：
改进的异硫qing酸胍/酚一步法（液体样品专用 TRIzol LS 法）裂解细胞和灭活 RNA 酶， 然后总 RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系 列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 最后低盐的 RNase free water 将纯净 RNA 从硅基质膜上洗脱。它具有下列特点：
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可 重复性好。
2. 结合了异硫qing酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点， 不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA 可以直接从离心柱上洗脱避免了过度 干燥不易溶解问题。
3. 独有的 RLS 裂解液配方，可直接裂解全血，不需要先裂解去除红细胞。
4. 多次漂洗去蛋白过程，提取 RNA 纯度更高。
5. 有效的去除了 5S 在总 RNA 中含量，提高了纯度。
规格及成分：
| 成 份 | 大纸盒包装 |
| 裂解液 RLS | 50 mL |
| 去蛋白液 RE | 25 mL |
| 漂洗液 RW | 1O mL 第一次使用前按说明加指定量乙醇 |
| RNase-free H2O | 10 mL |
| 收集管（2ml） | 50 个 |
| RNase-free 吸附柱 RA | 50 个 |
| 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂：无水乙醇。
本产品仅供科研
使用方法：
1. 取 0.25 ml 血液（或血清，血浆，脑脊液等等)加入 0.75 ml 裂解液 RLS， 用加样枪吹打液体样品几次以帮助裂解样品中细胞。裂解液 RLS 和液体样 品的终体积比总是 3：1。
2. 将样品剧烈震荡混匀后，在室温静置 5 分钟以使核蛋白体完全分解。
3. 加 0.2 ml 氯仿，剧烈振荡 15 秒并室温静置 2 分钟。
4. 于 4℃ 13,000 rpm 离心 10 分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间 层和上层无色的水相，RNA 存在于水相中。水相层的容量大约为所加 RL S 体积的 60%，把水相转移到新管中，进行下一步操作。
5. 加入 0.5 倍体积无水乙醇，颠倒混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液 和可能沉淀一起转入吸附柱 RA 中（吸附柱套在收集管内）。
6. 室温（以下步骤均为室温）13,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液，将吸附 柱重新套回收集管。
7. 加 500 μl 去蛋白液 RE，12,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
8. 加入 500 μl 漂洗液 RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心 15 秒，弃掉废液。
9. 重复一遍步骤 8。
10. 将吸附柱 RA 放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗 液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11. 取出吸附柱 RA，放入一个 RNase free 离心管中，根据预期 RNA 产量在吸 附膜的中间部位加 30-50μl RNase free water（事先在 65-70℃水浴中加 热效果更好）， 室温放置 2 分钟，13,000 rpm 离心 1 分钟。如果需要较 多 RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心 1 分钟，,或者另外 再加 30μl RNase free water，离心 1 分钟，合并两次洗脱液。
如果需要 RNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积最好不 少于 30μl，体积过小降低 RNA 洗脱效率，减少 RNA 产量。
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文献和实验相关专题一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中，蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应，产生络合物，此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原，产生深蓝色复合物。在一定的条件下，蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测定样品的吸光度，与标准曲线对比，可确定其蛋白质含量。这种方法是检测可溶性蛋白质含量最灵敏的经典方法之一。三、 实验步骤1、 标准曲线的绘制(1) 取10ml具塞试管6支，编号，分别准确吸取
管，因其老化效率比橡胶管慢。 2、转速 高转速的优点： 在蒸发瓶和浴锅内产生最大湍流，瓶内表面浸润面积愈大，受热面积大，以实现最大的蒸汽输出。 蒸发瓶受热面积越大，蒸发速率越高。由于液体样品和蒸发瓶间的向心力和摩擦力的作用，液体样品在蒸发瓶内表面形成一层液体薄膜；样品的旋转所产生的作用力有效抑制样品的沸腾。 对于不同粘度的物料，存在最佳转速。（如：高粘度的样品，随着转速的增加，蒸馏性能会增加，样品粘附到烧瓶壁或产生过度泡沫，这时应适当降低转速） 3、水浴温度 加热锅温度越高，溶剂的蒸馏效果越快
仪 1.3 主要试剂 RNAlocker 、RNAout 、RNAsaver 、氯仿、异丙醇、75% 乙醇、琼脂糖、SYBRGREEN I 染料。 1.4 工具酶及试剂盒 TaKaRa One Step RNA PCR Kit 2. 方法 2.1 RNA 提取和纯化 估算RNAout 、组织或细胞的用量。取组织或细胞后，将剩余的组织或细胞放入RNAlocker 中保存以备下次使用。将组织或细胞匀浆后，加入1.5ml 离心
技术资料
