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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
480
- 英文名:
Red Cell Lysis Solution B
- 保质期:
1年
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
常温
- 规格:
250 mL
中文名称:红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)
英文名称:Red Cell Lysis Solution B
产品规格:250 mL
产品货期:1-2天
产品运输:常温运输
产品介绍:温和裂解红细胞,剩余细胞可用于流式细胞分析

产品及特点:
本产品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其 他淋巴细胞的完整性和生物学活性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不 含 DNA 和 RNA,其所含血红素能抑制 PCR 反应,所以先用本产品裂解红细 胞,再提取基因组 DNA 或 RNA 有助于提高所得样品纯度。
1. 可以处理人全血、小鼠全血、脾细胞中的红细胞。
2. 高效,一次处理能裂解 80%以上的哺乳动物红细胞,能回收 90%左右的 白细胞。一般样品最多只需要处理两次。
3. 扩容性好, 可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理 100 uL 的 血液。
4. 基于 NH4Cl 裂解法,得到的白细胞主要用于流式细胞分析。
5. 本产品只能用于科研,不能用于临床。

规格及成分:
| 成 份 | 大立盒包装 |
| 红细胞裂解液 B 型 | 250 mL |
| 使用手册 | 1 份 |
运输及保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。
自备试剂:去离子水
本产品仅供科研

使用方法:
用去离子水将本产品(10×)稀释为 1×工作液(1 mL 本产品加 9 mL 去离子水),待温度回到室温或 37℃加热到 37℃的时候再使用。工作液不能 长期放置,只能现配现用。
一.裂解哺乳动物全血中的红细胞
1. 离心哺乳动物抗凝血液后弃血浆部分,按每 1 mL 哺乳动物抗凝血液细 胞沉淀加 10 mL 1×工作液的比例加入红细胞裂解液 B 型的 1×工作 液。
2. 轻柔吹打充分混匀。
3. 室温放置 15 分钟(注意:放置时间不要超过 15 分钟)。
4. 4℃1000 rpm 离心 10 分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 1-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如 Hanks 溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
二.裂解组织细胞中的红细胞
1. 按标准方法用自备的胰酶将组织消化成单个细胞悬液,离心弃上清。
2. 按 1:10 的比例向细胞沉淀中加入红细胞裂解液 B 型工作液,轻柔吹打 均匀。
3. 室温放置 15 分钟(注意:放置时间不要超过 15 分钟)。
4. 4℃ 1000 rpm 离心 10 分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 2-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如 Hanks 溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
相关资料:
人的全血可分为血浆与血球两部分,各占血液的 55%与 45%。血球又可分 为红血球(RBC)、白血球(WBC)与血小板,其所占比例为 500:1:30。血 液中 WBC 的数量会随年龄、性别等生理状态而异,正常成人的 WBC 参考 数值为 4500 ~ 11000 / uL,2 岁以前之孩童的 WBC 参考数值则为 5000 ~ 13000 /uL。全血中所含有 DNA 含量为 30~60 ug/mL (6 pg/cell),RNA 含量为 1~5 ug/mL,plasma protein 含量为 60~80 mg/mL。
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文献和实验的上样条件。细胞量为1×106 个/ml,1ml。 2) 上机前,应对样本进行混合,以使样本均一(注意使用排枪吹打,勿产生气泡)。 3) 以上protocol 仅针对于悬浮细胞。 4) 药物刺激浓度需先做梯度检测。 第七章 流式细胞分析分选术 42 2. Cell Cycle Assay 常用的实验细胞株包括:293(T),MCF7,U2OS,Saos,Hela 等 以U2OS 细胞为例 2.1 细胞培养及铺板 1) 细胞株及材料: a) 细胞
流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点: ①标本只要是单细胞即可用于分析,如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等,实体组织只要经处理
流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要是单细胞即可用于分析,如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等,实体组织只要经处理后制成单细胞悬液也能分析,因此,实际上所有组织细胞均可用于分析。②极短时间内可分析大量细胞,只要标本中的细胞数量足够
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