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文献和实验fengtingting2010 小鼠T细胞中beta-Actin的含量是多少啊,我要算小鼠T细胞中Foxp3的含量,如何知道呢?还有Western blot的抗体最适的稀释度如何确定,是全部做完后,拍片才能确定吗?一般加的抗体的体积是固定的吗?是10ul吗? fengtingting2010 如果上样量是20ug,体积是10ul。一抗和二抗的稀释度和体积如何确定呢?如何知道目的蛋白的丰度?万一目的蛋白的量仅在ng级别
现在仍然以逆转录RT-PCR为主要技术手段之一来做课题的可能不很多了,但恐怕很多人在过去的研究项目中使用过或者正在使用RT-PCR。很多人都是用用beta-actin或者GAPDH作为内参的,并且也有不少文章发表过了。最近偶然发现2001年就有文章《Beta-actin--an unsuitable internal control for RT-PCR》发表反对千篇一律用beta-actin做内参照,原因可能还不止一点。下面是该文被引用次数(100多次了)。尽管有不少文章在RT-PCR实验
qPCR引物设计,Primer3 Plus 和 Primerbank 都能搞定!
accession、NCBI protein accession、NCBI gene ID、primerbank ID、NCBI gene symbol 以及 keyword 六个选项进行搜索。以小鼠的 beta-actin 为例。1、首先,到 NCBI 上找出β-actin 的 gene ID,如图,选择 gene, 输入 beta-actin:点击右边的分类 musmusculus:结果就出来了,小鼠 beta-actin 的 NCBI gene ID 是 11461,而 actb 则是小鼠 beta-actin
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