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- KA&M-BIO
- 上海
- MZ8939
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 英文名：
pEnCMV-DLG1-3×FLAG
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 规格：
管
pEnCMV-DLG1-3×FLAG使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
圻明公司现货供应pEnCMV-DLG1-3×FLAG，可按客户需求单独构建载体，详询客服。公司整合了国外数个基因库资源，具有以下优势：
种属齐全：人、小鼠、大鼠、其它种属；
数量众多：多达几万数量cDNA克隆（cDNA模板质粒）和ORF克隆（ORF表达质粒）；
质量优异：保证目的基因序列正确，无氨基酸突变，每个克隆质粒均可提供相应的测序报告；
价格实惠：与您亲自调取基因相比，我们的服务让您更加省时、省力、省心；
pLV3-CMV-VIM(human)-Puro 哺乳细胞,慢病毒 基因表达 ORF 人 Amp Puro
pCMV-Mapk1(mouse)-3×FLAG-Neo 哺乳细胞 基因表达 ORF 小鼠 Amp Neo/G418
pCMV-TSNAX(human)-3×FLAG-Neo 哺乳细胞 基因表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pLV2-CMV-ATRAID(human)-EGFP-3×FLAG-Neo 哺乳细胞,慢病毒 基因表达 ORF 人 Amp Neo/G418 绿色
pLV2-CMV-FDX1(human)-3×FLAG-Neo 哺乳细胞,慢病毒 基因表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pCMV-Mapk3(mouse)-3×FLAG-Neo 哺乳细胞 基因表达 ORF 小鼠 Amp Neo/G418
pCMV-FBXL8(human)-3×FLAG-Puro 哺乳细胞 基因表达 ORF 人 Amp Puro
pCMV-CAMK2G(human)-3×HA-Neo 哺乳细胞 基因表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pAAV-stop-MCS-bGH 哺乳细胞,腺相关病毒 基因表达 ORF 空载体 Amp
pCMV-3×HA-SREBF1(human)-Neo 哺乳细胞 基因表达 ORF 人 Amp Neo/G418
pCMV-TERT(human)-EGFP-Neo 哺乳细胞 基因表达 ORF 人 Amp Neo/G418 绿色
pHelper_ShCAST_sgRNA 大肠杆菌 基因敲除 CRISPR Amp
pT7-6×His-FOXK2(human-gc-opt)(低拷贝) 大肠杆菌 基因表达 ORF 人 Kan
pT7-6×His-FOXK1(human-optimized)(低拷贝) 大肠杆菌 基因表达 ORF 人 Kan
pT7-6×His-ASXL1(human)(低拷贝) 大肠杆菌 基因表达 ORF 人 Kan
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文献和实验(Figure 2). Data generated from this assay is currently in submission. Procedure Part I: Detection of Flag-tagged proteins binding 5´ biotin labeled siRNAs in vitro 1.A minimum of ~4.0×106 cells are required/sample and clearly the more cells to begin
一、材料与方法 1. EDTA（无蛋白酶抑制剂）（Roche） 2. 毛地黄皂苷（EMDChemicals） 3. 蛋白酶抑制剂（DMSO，leupeptin，pepstatin）（Sigma） 4. BECKMAN离心管（BECKMAN） 5. ANTI-FlagM2亲和树脂（Sigma） 6. 3×FLAG肽（Sigma） 二、设备
，在翻转摇床上轻柔孵育2.5小时。 （7）400× g 离心1分钟。用移液管去除上清。保存80 μl 上清作为未结合对照。 （8）用1 ml 免疫沉淀缓冲液漂洗吸附柱，重复4次。 3. 洗脱带有FLAG标签的蛋白 用3×FLAG多肽洗脱。此方法洗脱效率极高 （1）准备3×FLAG洗脱缓冲液。加入30 μl 漂洗缓冲液（含0.25%digitonin和2 μg/μl 3×FLAG多肽） （2）向有吸附柱的试管中加入30 μl 3×FLAG洗脱缓冲
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