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南京万木春
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huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记
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huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记
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huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记
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常温/干冰
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- 英文名:
huh7s-luc
- 规格:
T25
产品名称:huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记、huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记、huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记、huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记;
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文献和实验huh7s-luc人肝癌索拉非尼耐药株-荧光素酶标记
待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒;2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等;3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染,设置不同的检测时间点,一般为24h/48h;4、外界干预: 转染后,可进行物理/化学/病毒等的相应刺激;5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作;6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
量筛选。自从20多年前,Marlene DeLuca's第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光的应用进入了一个新时代。生物发光和化学发光(BL/CL)的主要特点就在于发光信号的高度可测性,可以用PMT(光电倍增管)和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内,CL反应的特点是高光子产生效率,BL为05-0.8 ,CL为0.1-0.001。因此BL/CL的检测极限可以达到10-18到10-21摩尔,这显然要比其它的光学技术强的多。BL/CL已经
),绿色荧光蛋白(GFP),荧光素酶(Lux或Luc)以及b-半乳糖苷酶(b-gal)。可以使用简单的非同位素方法检测b-gal的表达以测定转染效率和活性。pCMV SPORT- bgal质粒包含CMV启动子调控下的LacZ基因,转染入真核细胞内后可以直接表达bgal。结合简单的检测步骤,可以做为监测转染条件的一种方便灵敏的方法。 09稳定转染细胞系的筛选 用载体中所含的选择标志进行筛选是建立稳定转染细胞系最常用的方法。抗生素抗性基因可以与目的基因在同一个质粒上,也可以在不同的质粒上。如果两个不同
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