高内涵筛选技术服务

高内涵药物筛选高效地结合了自动显微成像技术与图像分析技术，实现了对各类药物处理后细胞表型的多靶点多参数的同时检测， 具有快速、高特异性、高灵敏度的特点。更重要的是， 高内涵药物筛选是以细胞为单位进行信息筛选的，包括细胞大小、形态和胞质或胞核的染色强度， 并能自动剔除细胞碎屑的荧光干扰， 具有选择细胞群体和检测细胞变化的能力。该技术结合了超大广角的成像系统，高分辨率的荧光影像系统，高自动化的对焦系统，高智能的数据分析系统，可以一次性获取待筛选样品的多维立体信息和高通量的分析数据，帮助您更快速、更全面地获取待筛选样品的综合效用数据。

高内涵筛选系统与显微镜比较：
高分辨率显微镜：用于高内涵筛选前的预实验分析，实验操作简单，单次成像面积约0.1X0.1mm；
BD pathway 855：用于高内涵筛选过程的精确图像及数据分析，可获得清晰的细胞内部结构图，单次成像面积2X2 mm；
Acumen eX3：用于大量待筛选样本的高内涵初筛，筛选速度超快，单次成像面积20X20mm。




图1 高内涵系统的检测视野是荧光显微镜的数十倍




图3 BD高内涵筛选仪视野可达荧光显微镜的40倍，细胞数目可达数千个


图4 Acumen高内涵筛选仪视野可达覆盖全孔(6孔板)，细胞数目可达数万个



　　高内涵技术特点：

--自动化高通量多重检测

可用96孔板或384孔板进行细胞处理，一次分析多种不同药物(miRNA)，样本染色处理好之后可自动进行拍照获取图像并进行数据分析(如图， 96孔板筛选)。



--高速激光自动聚焦

在对处理好的96孔板或者384孔板进行拍照时，只需一次聚集调试，仪器自带的摄像设备会在不同孔间顺序移动，自动聚焦，对96孔板各孔图像采集所需时间在5分钟之内完成，保证了检测时间同步性。同一孔也可以进行多次拍照，从而获得一个孔尽可能多的细胞信息(如图，采用2x2的设置，对一个孔可进行4次成像，获得尽可能多的细胞信息)。


　　
--多色彩实时成像

只要荧光间无串扰，系统支持多种荧光标记，并对各种荧光分别拍照，实时成像。(如图，用绿色荧光标记p65、用红色荧光标记EdU插入的细胞、蓝色荧光标记细胞核)，图4显示的是常见荧光染料的发射波长范围，如果这些发射波长有重叠的话则会产生荧光串扰，进行荧光染料选择的时候应该避免产生荧光串扰。



　
--实时细胞统计分析

可对图像上的细胞进行统计分析，细胞数可以自动计算出来(如图)，将这些数据进行统计分析，从而寻找其中的生物学意义。





高内涵筛选应用范围

高内涵筛选技术的应用范围包括：细胞增殖、细胞凋亡、细胞毒性、细胞活力、细胞迁移、蛋白转运、RNAi靶点优化、受体内化、细胞毒性、细胞周期和信号转导等。
高内涵筛选的最大特点就是多参数的不同组合能够满足不同的检测要求. 例如对DNA、新合成的DNA、P65转录因子的检测可用于细胞增殖/凋亡相关信号通路的分析。

表1 高内涵筛选系统的检测项目

分析模式	荧光强度	荧光分布和共定位	形态学	运动和迁移
检测内容	●细胞内荧光强度变化	●标志蛋白在细胞器内的分布 ●细胞内标志蛋白间的共定位	●细胞大小 ●细胞形态	●细胞迁移测量
检测项目	●细胞增殖* ●细胞活性* ●细胞毒性* ●细胞周期* ●细胞凋亡* ●线粒体活性 ●脂及变性 ●IKB变性 ●氧分子和活性氧簇 ●整个生物体成像* (果蝇，拟南芥，斑马鱼) ●组织芯片	●质粒转位 ●DNA损伤（与修复） ●有丝分裂缺陷 （单极纺锤体） ●细胞凋亡 ●联会结点定位 ●荧光原位杂交 ●三维细胞成像 （干细胞，胰岛） ●信号通路分析	●管形成* （血管新生） ●神经突外生 ●微核分析 ●形态测量分析 （微管蛋白） ●细胞凋亡 （核大小，粒度）	●细胞迁移* ●细胞趋性化 ●细胞侵袭

注：*为常备检测项目，具体内容请点击查看；其他项目需定制，详情请电询。