转氢酶-1测试盒

转氢酶-1测试盒

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  • ¥850 - 1600
  • 优利科
  • YLK0245
  • 国产
  • 2025年07月11日
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    • 技术资料
    • 库存

      100

    • 英文名

      /

    • CAS号

      /

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50管/48样/100管/96样

    规格:50管/48样产品价格:¥850.0
    规格:100管/96样产品价格:¥1600.0
    转氢酶-1测试盒

    中文名称:转氢酶-1测试盒

    货号:YLK0245
    测试方法:微量法、紫外分光光度法
    产品规格:100管/96样、50管/48样

    正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定


    测定意义 TH 位于线粒体的内膜上,又称为呼吸电子传递链复合体六,催化 NADH+NADP+和 NAD+ +NADPH 相互转化。催化正向反应称为 TH-1。线粒体 NADH 含量增加时会导致线粒 体膜的 H+电化学梯度升高,因而促进了电子传递链上 ROS 的产生。TH-1 促进 NADH 转换 为 NADPH,从而提高线粒体的抗氧化能力。

    测定原理 NADH 和 NADPH 均在 340nm 有特征吸收,因此 TH 催化的转氢反应不能导致 340nm 吸光度发生变化。用人工合成底物 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸(APADP+)替代 NADP+, TH-1 催化 APADP+还原生成的 APADPH 在 375nm 有特征光吸收,因此通过测定 375nm 光 吸收增加速率,来计算 TH-1 活性。

    需自备的仪器和用品 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、 研钵、冰和蒸馏水。

    本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
     

    样本的前处理: 组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
    ① 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1mL 试剂一,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
    ② 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
    ③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11100g,4℃离心 10min。
    ④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的 TH-1(此步可选做)。
    ⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入 500uL 试剂二,超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W, 超声 3s,间隔 10 秒,重复 30 次),用于 TH-1 活性测定。


     

    转氢酶-1测试盒转氢酶-1测试盒

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