线粒体呼吸链复合体Ⅳ/细胞色素C氧化酶测试盒

中文名称：线粒体呼吸链复合体Ⅳ/细胞色素C氧化酶测试盒
货号：YLK0243
测试方法：微量法、可见分光光度法
产品规格：100管/96样、25管/24样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义： 线粒体复合体Ⅳ又称细胞色素 C 氧化酶，也是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成 分，负责催化还原型细胞色素 C 的氧化，并最终把电子传递给氧，生成水。

测定原理： 还原型细胞色素 C 在 550nm 有特征光吸收，线粒体复合体Ⅳ催化还原型细胞色素 C 生成氧 化型细胞色素 C，因此 550nm 光吸收下降速率能够反映线粒体复合体Ⅳ酶活性。

需自备的仪器和用品： 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、 研钵、冰和蒸馏水。

本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
 

样本的前处理： 组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
1、 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆 器或研钵匀浆。
2、 将匀浆 600g，4℃离心 5min。
3、 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11100g，4℃离心 10min。
4、 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅳ（此步可选 做）。
5、 步骤④中的沉淀即为线粒体，加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴， 功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10 秒，重复 30 次），用于复合体Ⅳ酶活性测定。
 

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