Sino Biological EPS15兔多抗（抗原亲和纯化） Human特异性 WB/IHC-P/IP适用

【原创】组织免疫共沉淀的实验方法

: 0.1-2%Detergent, ionic: 0.01-0.5%Divalent cations: 0-10 mMEDTA: 0-5 mMpH: 6-91. 非变性裂解buffer：适用于抗原类型：可溶于变性剂并且其天然状态可被抗体识别20 mM Tris HCl pH 8137 mM NaCl10% glycerol1% Nonidet P-40 (NP-40)2 mM EDTA4°C 可保存6个月使用前加入：Protease inhibitors上述溶液中NP-40可使用Triton X-100

【讨论】抗体和那些不能说的"秘密"-抗体选择的PASS标准 (请加精)

（Purification），抗原信息（Antigen），抗体的特异性（Specificity）以及抗体的 种属来源（Species）这四个方面的相关信息。 Purification 抗体的优劣，包括特异性，效价等方面和生产抗体过程中使用的纯化工艺是直 接相关。但科研人员在选择抗体的时候去常常忽略这个方面。 在行业内，使用蛋白A或G纯化单克隆抗体的方法被广泛接受。那么，多克隆抗体纯化工艺 呢？ 很多公司都使用亲和纯化（affinity

【资源】Western Blot 简略而细致

5%的Milk(TBST溶解)，按要求稀释好抗体。注意，如需高比例稀释，最好采用梯度稀释。 C. 将稀释好的抗体和膜一起孵育。 一般采用RT 1小时，可根据抗体量和膜上抗原量适当延长或缩短时间。 注意：为了便于后面分析结果，我们一般会选用已确定分子量大小而且纯度高的抗体作为marker与一抗同时孵育。 六、洗涤 用 TBST先快速洗三次，把milk尽快的wash掉。然后5mins *5。 洗涤是为了洗去一抗与抗原的非特异性结合，洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。 七、孵育二抗 孵育 RT