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文献和实验干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密
。其中 IS50R 和 IS50L 的序列高度同源,只是 IS50L 的一个碱基存在突变。IS50 具有 19bp 的倒置末端(ES),外末端 outside end(OE)和内末端 inside end(IE),两末端倒置有 7 个碱基不同。此倒置末端是转座酶(Tnp)的作用位点,在转座过程中,将转座子从供体 DNA 中完全切除,并插入到目标 DNA 中。IS50L 和 IS50R 均含有编码转座酶(TnP)以及转座阻遏蛋白(lnh)的基因,但由于 IS50L 中的碱基突变,造成翻译提前终止,所以仅
冷冻 23 年的睾丸组织,仍能产生有活力的精子!新研究为这些患者带来福音……
表达变化相似。长期冷冻的样品在未分化的精子中显示出增强的干细胞信号传导,并且圆形精子细胞较少。对长期冷冻和短期冷冻的 DEGs 进行细胞类型特异性通路分析显示,SSC 群体中最显著的变化包括经典的 SSC 自我更新通路,如 GDNF 家族配体受体相互作用、MAPK 信号通路和癌症信号通路上调。 在不同处理组中,两个表达差异最显著的基因是 Prm1 和 Tnp1。这些基因在圆形精子细胞中表现出高度显著的差异,Prm1 在新鲜移植和短冷冻中分别比移植长冷冻高 2.0 倍和 2.3 倍。同样,Tnp
经验分享|动物活体光学成像实验——荧光成像(一)【自发荧光】
似的荧光波长,导致低信噪比,检测灵敏度受限,在某些情况下甚至根本无法检测或显示标记物荧光。 例如,比较常用的标记物 GFP,其最佳激发波长为 470 nm,最佳发射波长为 509 nm。在被 470 nm 激发光激发,会发射出波长 509 nm 为主的绿色荧光。另一方面,生物体内普遍存在的胶原蛋白和弹性蛋白也会发射出>515 nm 的自发荧光,对标记物的检测造成了一定的干扰。因此,掌握不同物质的光谱信息,对清晰地观察实验动物体内标记物尤为重要。 自发荧光来源信息表 (Billinton N
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