- ￥450
- YLKBIO
- YLK0114
- 国产
- 2025年12月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
/
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
中文名称：NADH氧化酶（NOX）测试盒(可见分光光度法)
货号：YLK0114
测试方法：可见分光光度法
产品规格：50管/48样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
NOX 能够将 NADH 氧化为 NAD，NADH 的氧化与 2,6 二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联， 蓝色的 DCPIP 被还原为无色的 DCPIP，在 600nm 下测定蓝色 DCPIP 的还原速率计算出 NADH 氧化酶活性的大小。
测定原理
LDH 催化 NAD+氧化乳酸生成丙-酮酸，丙-酮酸进一步与 2, 4 - 二硝基-苯-肼作用生成丙-酮酸二 硝-基-苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙-酮酸浓度成正比。
本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸 馏水
试剂的组成和配制：
试剂一：液体 50mL×1 瓶，-20℃保存。
试剂二：液体 10mL×1 瓶，-20℃保存。
试剂三：液体 1mL×1 瓶，-20℃保存。
试剂四：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂五：液体 6 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂六：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 5mL 蒸馏水；用不完的试剂分装后-20℃ 保存，禁止反复冻融。
样本的前处理： 组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
① 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆 器或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g，4℃离心 5min。
③ 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心 10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的 NOX（此步可选做）。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体，加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴， 功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10 秒，重复 30 次），用于 NOX 活性测定。 血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 600nm，蒸馏水调零。
2、 样本测定 （1）试剂四、试剂五和试剂六于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）孵育 5min。 （2）在 1mL 石英比色皿中加入 40μL 样本、700μL 试剂四、100μL 试剂五和 160μL 试 剂六，混匀，记录 600nm 处 20s 时吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2，计算 ΔA=A1-A2。
如需了解更多有关于NADH氧化酶（NOX）测试盒(可见分光光度法)的信息或说明书敬请联系我们！期待与您的合作！
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