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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C
- 保质期:
2年
- 英文名:
Polybrene
- 库存:
现货
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- CAS号:
28728-55-4
- 规格:
1mL
| 产品描述 | |
| 描述 | Polybrene(聚凝胺)是一种多聚阳离子聚合物,常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒及慢病毒介导的基因转染,作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序,因为小剂量的Polybrene在自动测序分析中可明显改善多肽的降解现象。 |
| 浓度 | 10mg/ml |
| 使用方法 | 实验1:逆转录病毒感染(RetroviralInfection) (1)重组逆转录病毒原液的制备:取5ml生长培养基加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后,吸去培养液并用0.45μm滤器过滤 (2)待感染细胞的培养:100mm培养盘内加入10ml完全培养基,细胞密度约为5×105/盘。 (3)病毒感染:细胞培养24h后,吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清(或将病毒原液稀释到2ml)感染细胞,polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37°C孵育3-6h。 (4)收集病毒颗粒:加入8ml完全培养基。感染3天后,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。 实验2:转染 (1)完全生长培养基培养细胞,培养细胞密度约50%; (2)孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基-Polybrene混合液,按如下操作制备混合液: ①添加完全培养基(60mm培养皿2ml,100mm培养皿3ml)37°C预热; ②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀; ③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。 (3)去除培养基,在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液,在37°C孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。 (4)去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shocksolution(15%DMSOin1×HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3ml,100mm培养皿4ml)。每次加入溶液时用手轻轻摇晃培养盘10s,使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。 (5)立即去除DMSO shocksolution,用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗,100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。 (6)加入完全培养基到细胞中; (7)稳定转化:去除生长培养基,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。瞬时表达:去除生长培养基,加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。 |
| 储存/保存方法 | -20°C,有效期2年。 |
| 注意事项 | 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| 基本信息 | |
| 外观 | 溶液 |
分子结构图:
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文献和实验- SARS-CoV-2 ORF3a positively regulates NF-κB activity by enhancing IKKβ-NEMO interactionYing Nie, Lumin Mou, Qizhou Long, Dongqing Deng, Rongying Hu, Jinzhi Cheng, Jiahong Wu
VIRUS RESEARCH. 2023 Mar 13 .
影响因子: 6.286
- Ginkgolic acids inhibit SARS-CoV-2 and its variants by blocking the spike protein/ACE2 interplayYusen Xiang, Guanglei Zhai, Yaozong Li, Mengge Wang, Xixiang Chen, Ruyu Wang, Hang Xie, Weidong Zhang, Guangbo Ge, Qian Zhang, Yechun Xu, Amedeo Caflisch, Jianrong Xu, Hongzhuan Chen, Lili Chen
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES. 2022 Dec 12 .
影响因子: 8.025
- Structure-Based Virtual Screening and Identification of Potential Inhibitors of SARS-CoV-2 S-RBD and ACE2 InteractionJiacheng Xiong, Yusen Xiang,Ziming Huang,Xiaohong Liu,Mengge Wang,Guangbo Ge,Hongzhuan Chen,Jianrong Xu,Mingyue Zheng,Lili Chen
Front Chem. 2021 Sep 27 .
影响因子: 5.221
- 环状RNA circADARBl在NK/T细胞淋巴瘤中的临床意义及分子机制研究梅湄
郑州大学. 2020 Jun 01 .
- 水通道蛋白3在NK/T细胞淋巴瘤细胞对吉西他滨耐药中的研究李苗苗
郑州大学. 2019 May 01 .
- miR-146b promotes cell proliferation and increases chemosensitivity, but attenuates cell migration and invasion via FBXL10 in ovarian cancerMeina Yan, Xinxin Yang, Rong Shen, Chengjiang Wu, Hui Wang, Qing Ye, Peifang Yang, Lubin Zhang, Miao Chen, Bing Wan, Qinqin Zhang, Sheng Xia, Xiaodong Lu, Genbao Shao, Xiaoming Zhou, Jun Yu, Qixiang Shao
Cell Death & Disease. 2018 Nov 08 .
影响因子: 6.304
作者:邓光权 作者单位:广东省粤北人民医院,韶关 512026 【摘要】为了比较贫血病人低红细胞浓度对盐水介质配血及改良聚凝胺配血的影响,将30例贫血病人每人抽取的静脉血4 ml,注入干试管2 ml,另外2 ml注入38%枸橼酸钠管作为交叉配血标本。干试管和枸橼酸钠管标本分别用离心机2500r/分钟离心10分钟,分离出血清尽量取足量的红细胞50 μl进行稀释,病人红细胞以盐水稀释成3%作为原液进行不同的稀释并与O型血的血清作盐水介质配血
一、材料与试剂 1. 小鼠2. 抗CD3与抗CD28抗体(Biolegend,100302,102102)3. 白细胞介素-2(IL-2)(R&Dsystems402-ML-020)4. 聚凝胺(Polybrene)(hexadimethrinebromide,SIGMAH9268)5. RPMI-1640培养基(GIBCO,11875-093)6. FBS(GEMBIO900-108)7. 青霉素/链霉素溶液(GIBCO15140-122)8. 2-巯基
目前医院常规交叉配血一般用盐水法,但盐水交配不能检出免疫性IgG抗体,因而有输血反应的危险。而检测红细胞血型IgG抗体所用酶法,抗球蛋白法由于步骤多、时间长及试剂、仪器等因素不适合常规及急诊配血。Polybrene法(聚凝胺)能快速、灵敏地检测IgG抗体。现将上述四种检测IgG抗体的方法比较如下。 1 材料与方法 1.1 试剂 Polybrene试剂盒由东耀企业有限公司提供。









