- ￥200
- Genesand/金沙
- ST111
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
2×GS Taq PCR Mix
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京金沙生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
5×1.0 mL
2×GS Taq PCR Mix
目录号
ST111
产品组成
| 组分 | 规格 |
| 2×GS Taq PCR Mix | 5×1.0 mL |
保存条件
-20℃保存24个月。
产品简介
本产品包含高纯度GS Taq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系，浓度为2×， 只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增，可有效扩增3 kb以内的DNA片段。体系中包含有蓝色电泳指示剂，可在扩增完成后直接上样进行电泳检测，其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500 bp双链DNA片段相近。
使用本产品扩增的PCR产物3’端带有一个突出的"A"碱基，纯化后可直接用于TA克隆。
产品特点
- 操作简单：2×Mix，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增；
- 极快的延伸速度：10~15 s/kb。
适用范围
适用于常规PCR扩增。
注意事项
1. 请使用高质量的模板进行扩增；
2. PCR Mix应避免反复冻融，短期内多次使用可置于4℃保存。
使用方法
操作示例
按下表配制PCR反应体系（冰上操作）
| 组分 | 25 μL体系 | 50 μL体系 | 终浓度 |
| 2×GS Taq PCR Mix | 12.5 μL | 25 μL | 1× |
| Primer 1 (10 μM) | 1.0 μL | 2.0 μL | 0.4 μM |
| Primer 2 (10 μM) | 1.0 μL | 2.0 μL | 0.4 μM |
| Template DNA* | As require | As require | |
| ddH2O | Up to 25 μL | Up to 50 μL |
基因组DNA：10~1000 ng；
质粒DNA：1~30 ng；
cDNA：1~2 μL(不超过PCR反应总体积的1/10)。
（以上为推荐的模板使用量，实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异，可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。）
建议的PCR条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 25 s | 30~35 cycles |
| 退火 | 55~64℃ | 25 s | |
| 延伸 | 72℃ | 10~15 s/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 1~5 min | 1 |
| - | 4℃ | Hold | - |
常见问题与解决办法
Q1：扩增无产物或产物量少？
A1：
- 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板；
- 模板浓度过低。适当增加模板用量；
- 引物不合适。优化引物设计；
- 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度；
- 循环数过少。适当增加5~10个循环；
- 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至20~30 s/kb。
Q2：扩增出现非特异条带或弥散带？
A2：
- 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增；
- 引物浓度过高。降低引物浓度；
- 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板；
- 退火温度过低。适当提高退火温度或使用Touchdown PCR程序；
- 循环数过多。减少循环数至25~30 cycles。
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文献和实验for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
5 min 结果：可见Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix试剂对于原核或真核生物DNA均可高效。相较于同类的taq mix的扩增效率更高，且对于高GC含量也可得到很好的扩增。取扩增产物10 μL用1%琼脂糖凝胶电泳如图可见明亮条带。 三、 cDNA扩增 人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA扩增1.2 kbp片段 模板：人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA 200 ng/50 μL Primer： PrimerF
Cloning of Taq polymerase-amplified PCR products
" vector) Taq polymerase has a nontemplate-dependent terminal transferase activity that adds a single deoxyadenosine (A) to the 3´ ends of PCR products. The linearized vector supplied in this kit has single, overhanging 3´ deoxythymidine (T) residues
