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- XYBIO
- XY-PCR0663
- 国产
- 2025年12月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Squash Mosaic Virus(SqMV)
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
产品规格：50次
运输、保存：低温运输，-20℃保存
有效期：1年
货期：详询
PCR技术，即聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年获诺贝尔化学奖）建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍，这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义，极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析最常用的技术，而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。
实验目的
1.掌握聚合酶链式反应的原理。
2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。
南瓜花叶病毒RT-PCR试剂盒实验试剂与器材
模板DNA、2.5mmol/L dNTP
Taq DNA聚合酶（5U/μL）、SSR引物
10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O
PCR仪、移液枪、PCR板
南瓜花叶病毒RT-PCR试剂盒特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2.引物和探针经过优化，灵敏性高,能达到 100 拷贝/反应。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.特异性高。
5.既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5 各数量级。
6.本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。
7.本产品只能用于科研。
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文献和实验请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分？
各位老师： 您们好！偶欲做几个基因的RT-PCR实验。偶先用传统的半定量两步法RT-PCR试剂盒(TaKaRa DRR019A)扩增了几个基因，并用该试剂盒反转录了不少cDNA。但还有2个基因偶打算用real time PCR法来扩增。拟采用TaKaRa DRR041S试剂盒。但是TaKaRa DRR041S试剂盒说明书上写的反转录步骤是使用另外一个单独的RT Reagents (TaKaRa DRR033A)，得到cDNA再用TaKaRa DRR041S试剂盒扩增。但是仅一个RT
的5'和3’末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等(1988)发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5’和3’端，包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善，克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点(Frohman等,1995:Schaefer,l995: Chen,1998: Bespalova等,1998: Matz等11999)。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR
要的所有组分。可以用来从低至0.1pg的总RNA中检测看家基因（housekeeping genes）（见图2），以及通过RT-PCR从长达12kb的靶标中合成高产量的cDNA。 在室温度下运输、贮存和组合反应混合物,使得这个RTS试剂盒成为进行多种RT-PCR应用的理想选择。 图2-SuperScript™III RTS First-Strand Synthesis System以方便的形式提供高灵敏度 使用
