1.5mL微量离心管，无色

类器官培养与应用——肠类器官

、在立体显微镜下，可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体，并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。   中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后，将微量离心管垂直放置在管架上 10min，此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清，控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻，添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml)，Noggin (终浓度100

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 收集上清（约 30 ml）并加入 30 μg 的适当抗体，4 ℃ 摇动免疫沉淀物 1 h。 加入 0.9 ml 的蛋白质 A-Sepharose 悬液，4 ℃ 摇动免疫沉淀物 30 min。 用含 900 mmol/L NaCl 的 NETN 洗蛋白 A-Sepharose 混合物，再重复洗 5 次。最后，用 NETN 洗

类器官培养与应用——肺类器官

板置于显微镜下。在不破坏单层细胞的情况下，用移液器吸头轻轻移出自由漂浮的球体，并将其转移到 1.5ml 的离心管中。让球状体在离心管底部沉降 5-10 min，必要情况下可以用微量离心机低速离心 10s。 9、将吸出的球体接种于 200μl  含蛋白浓度 8.0mg/ml 的 Matrigel 胶中，轻轻吹打混匀，迅速操作并防止气泡产生。 10、在 24 孔板的每个培养孔中心接种 25μl  混合液，放入 37℃ 培养箱中静置 10min。待 Matrigel 凝固后，加入 0.5ml hLOs